| 研究概要 |
Rab8は小腸上皮細胞において頂端面方向への輸送を制御していることが明らかになっている。本研究ではRab8の上皮極性細胞での分子機能を明らかにするため、Rab8の結合タンパク質の同定を行うことが主目的であった。
酵母ツーハイブリッド法により新規結合タンパク質Rab8BPが得られた。Rab8BPに対する抗体を用いてHeLa細胞を染色するとRab8と共局在することが明らかになった。また、Rab8BPをRNAiでノックダウンするとRab8の細胞内局在に異常が観察された。さらにRab8BPに結合するタンパク質を同定するためにGST-pull down法を用いた実験を行ったところRab8BPIPが得られた。Rab8BPIPのドメイン構造よりRab8BPIPは膜のチューブ構造を形成するタンパク質であることが示唆される。Rab8BPIPもRab8ならびにRab8BPとHeLa細胞内において共局在することがわかった。
よってRab8はRabBP,Rab8BPIPと共に、トランスゴルジネットワーク以降のタンパク質輸送において膜チューブ構造を介した輸送経路を制御することが明らかとなった。さらにRab8BPの組織分布をイムノブロットで調べたところ、肺と小腸に高い発現が観察された。肺と小腸は特に上皮細胞が発達している組織であり、Rab8の機能を考えると非常に興味深い発見である。
Rab8BPやRab8BPIPがRab8と同じように頂端面方向への輸送を制御しているかを検証するために小腸初代培養を用いた実験を計画しており、現在その培養法の習得まで完了している。
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