下垂体前葉細胞を用いた３次元培養法の開発とその応用

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23790233
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 塚田 岳大 自治医科大学, 医学部, 助教 (50596210)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 下垂体前葉 / 3次元培養 / 組織構築 / 細胞外マトリックス / 濾胞星状細胞

研究概要

本研究の目的は、（１）ラット下垂体前葉細胞を用いた3次元培養法の確立と（２）3次元培養法を用いた下垂体前葉細胞の新規の機能探索、である。申請者は、ハンギングドロップ3次元培養法を用いてラット下垂体前葉細胞を培養し、生体内の下垂体前葉構造を再現したin vitro実験モデルを確立することに成功した。さらに、この実験系を用いて、ホルモンを産生しない濾胞星状細胞が下垂体前葉内の細胞外マトリックス（コラーゲンやラミニン）の形成に必須であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Reassembly of anterior pituitary organization by hanging drop three-dimensional cell culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Kouki T, Fujiwara K, Ramadhani D, Horiguchi K, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Acta Histochem Cytochem 巻: Vol. 46 ページ: 121-127
  • DOI: 10.1267/ahc.13015
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laminin and collagen modulate expression of the small leucine-rich proteoglycan fibromodulin in rat anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Syaidah R, Horiguchi K, Fujiwara K, Tsukada T, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Cell Tiss Res 巻: Vol. 354 ページ: 633-638
  • DOI: 10.1007/s00441-013-1698-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in fine structure of pericytes and novel desmin-immunopositive perivascular cells during postnatal development in rat anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Jindatip D, Fujiwara K, Horiguchi K, Tsukada T, Kouki T, and Yashiro T
  • 雑誌名: Anat Sci Int 巻: Vol. 88 ページ: 196-203
  • DOI: 10.1007/s12565-013-0180-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of the cell-surface heparan sulfate proteoglycan syndecan-2 in developing rat anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Syaidah R, Fujiwara K, Tsukada T, Ramadhani D, Jindatip D, Kikuchi M and Yashiro T
  • 雑誌名: Cell Tiss Res 巻: Vol. 353 ページ: 473-481
  • DOI: 10.1007/s00441-013-1641-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of small leucine-rich proteoglycans in rat anterior pituitary gland (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Syaidah R, Fujiwara K, Tsukada T, Ramadhani D, Jindatip D, Kikuchi M and Yashiro T
  • 雑誌名: Cell Tiss Res 巻: Vol. 315 ページ: 207-212
  • DOI: 10.1007/s00441-012-1513-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laminin isoforms and laminin-producing cells in rat anterior pituitary (2012)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, Fujiwara K, Horiguchi K, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Acta Histochem Cytochem 巻: Vol. 45 ページ: 309-315
  • DOI: 10.1267/ahc.12028
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of the proteoglycan syndecan-4 and the mechanism by which it mediates stress fiber formation in folliculostellate cells in rat anterior pituitary gland (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Kouki T, Fujiwara K, Tsukada T, Ly F, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: J Endocrinol 巻: Vol. 214 ページ: 199-206
  • DOI: 10.1530/JOE-12-0156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of chemokine CXCL12 and its receptor CXCR4 in folliculostellate (FS) cells of the rat anterior pituitary gland : the CXCL12/CXCR4 axis induces interconnection of FS cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Ilmiawati C, Fujiwara K, Tsukada T, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: Vol. 153 ページ: 1717-1724
  • DOI: 10.1210/en.2011-193
  • 査読あり
• [雑誌論文] Caveolin 3-mediated integrin beta1 signaling is required for the proliferation of folliculostellate cells in rat anterior pituitary gland under the influence of extracellular matrix (2011)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Fujiwara K, Ilmiawati C, Kikuchi M, Tsukada T, Kouki T, and Yashiro T
  • 雑誌名: J Endocrinol 巻: Vol. 210 ページ: 29-36
  • DOI: 10.1530/JOE-11-0103
  • 査読あり
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるTGFbeta2を介した濾胞星状細胞と周皮細胞の新規細胞間相互作用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、藤原研、Ramadhani Dini、矢田部恵、屋代隆
  • 学会等名: 第119回日本解剖学会
  • 発表場所: 栃木
  • 年月日: 20140327-29
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるエンケファリン前駆体遺伝子発現細胞の同定 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤原研、塚田岳大、Tofrizal bin Alimuddin、Rita Maliza、Khongorzul Batchuluun、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第119回日本解剖学会
  • 発表場所: 栃木
  • 年月日: 20140327-29
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるTGFb2の発現とその作用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、堀口幸太郎、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第38回日本比較内分泌学学会
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 20131024-26
• [学会発表] Spatio-temporal expression of laminin isoforms in rat anterior pituitary gland during the postnatal development (2013)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, Azuma M, Tofrizal A, Maliza R, Batchuluun K, Syaidah R, and Yashiro T
  • 学会等名: 第17回日本内分泌病理学会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20131004-05
• [学会発表] 胎生ラット下垂体におけるミッドカインの発現 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤原研、Rita Maliza、Khongorzul Batchuluun、Dini Ramadhani、矢田部恵、塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第28回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 岩手
  • 年月日: 20130807-09
• [学会発表] Folliculostellate cells interact with microvessel mural cell'pericyte'to maintain collagen arrangement in rat anterior pituitary (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Fujiwara K, Ramadhani D, Kouki T, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 学会等名: The Endocrine Society's 95^<th > Annual Meeting & Expo
  • 発表場所: San Francisco, CA, US
  • 年月日: 20130615-18
• [学会発表] Laminin isoform expression during the anterior pituitary development of rat (2013)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, and Yashiro T
  • 学会等名: The Endocrine Society's 95^<th > Annual Meeting & Expo
  • 発表場所: San Francisco, CA, US
  • 年月日: 20130615-18
• [学会発表] 下垂体前葉の組織構築における濾胞星状細胞の役割‐3次元培養法を用いた解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第118回日本解剖学会(シンポジウム : 内分泌細胞の発生・分化・機能調節)
  • 発表場所: 香川
  • 年月日: 20130328-30
• [学会発表] Alteration of laminin isoform expression during the anterior pituitary development of rats (2013)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani Dini、塚田岳大、幸喜富、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第118回日本解剖学会
  • 発表場所: 香川
  • 年月日: 20130328-30
• [学会発表] Laminin and collagen modulate expression of fibromodulin in folliculo-stellate cells of anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Syaidah Rahimi,、堀口幸太郎、Ramadhani Dini、塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第118回日本解剖学会
  • 発表場所: 香川
  • 年月日: 20130328-30
• [学会発表] ラット下垂体前葉における濾胞星状細胞とLH細胞の細胞間相互作用 : 基底膜構築への関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、藤原研、幸喜富、堀口幸太郎、屋代隆
  • 学会等名: 第37回日本比較内分泌学学会
  • 発表場所: 福井
  • 年月日: 20121129-1201
• [学会発表] Changes in laminin isoforms during the development of rat anterior pituitary (2012)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani Dini、塚田岳大、藤原研、屋代隆
  • 学会等名: 第16回日本内分泌病理学会
  • 発表場所: 宮城
  • 年月日: 20121011-12
• [学会発表] Leiomodin2 is an Antagonist of Tropomodulin1 at the Pointed End of the Thin Filaments in Cardiac Muscle (2012)
  • 著者名/発表者名: Pappas CT, Tsukada T, Moroz N, Antin PB, Kostyukova AS, and Gregorio CC
  • 学会等名: 41^<st> European Muscle Conference
  • 発表場所: Rhodes, Greece
  • 年月日: 20120901-05
• [学会発表] 下垂体前葉LH細胞のラミニン分泌に対する濾胞星状細胞の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、幸喜富、藤原研、屋代隆
  • 学会等名: 第27回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20120809-11
• [学会発表] マイクロアレイを用いたラット濾胞星状細胞における遺伝子発現解析―新規傍分泌因子ミッドカインの同定― (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤原研、Depicha Jindatip、堀口幸太郎、塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第27回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20120809-11
• [学会発表] Expression of laminin isoforms in rat anterior pituitary gland during the prenatal and postnatal development (2012)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani Dini、塚田岳大、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第27回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20120809-11
• [学会発表] 下垂体研究における三次元培養法の導入 (2012)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大
  • 学会等名: 第14回下垂体形態学ミーティング
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 20120326-28
• [学会発表] Expression of laminin isoforms during anterior pituitary development in the rat (2012)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani Dini、塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第14回下垂体形態学ミーティング
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 20120326-28
• [学会発表] 周皮細胞のコラーゲン産生における下垂体濾胞星状細胞の役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、Jindatip Depicha、幸喜富、屋代隆
  • 学会等名: 第14回下垂体形態学ミーティング
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 20120326-28
• [学会発表] 下垂体前葉のコラーゲン合成における濾胞星状細胞の役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、幸喜富、藤原研、屋代隆
  • 学会等名: 第36回日本比較内分泌学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20111123-25
• [学会発表] 下垂体前葉細胞の3次元培養法を用いた細胞外マトリックス構築メカニズムの解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、幸喜富、Reza Mohamad、屋代隆
  • 学会等名: 第26回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20110825-27
• [学会発表] (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T and Yashiro T
  • 学会等名: Workshop On Immunohistochemical Method as An Important Basic Diagnostic Tool in Medical Science
  • 発表場所: Padang, Indonesia
  • 年月日: 2011-06-15
• [学会発表] Introduction of the 3 dimensional cell culture system into pituitary research (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T
  • 学会等名: International Symposium on A New Regulatory System of Anterior Pituitary Cell Function and Its Clinical Impact
  • 発表場所: Padang, Indonesia
  • 年月日: 2011-06-14
• [図書] Endocrine control of osmoregulation. In F. Trischitta, Y. Takei, and P. Sebert (Eds.) (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsu k ad a T, Wong MK, Ogoshi M, and Yuge S
  • 総ページ数: 178-224
  • 出版者: Eel Physiology. CRC Press, Boca Raton, FL