カルモジュリンをリンクさせた変異体を用いたL型Caチャネルの活性調節機構の解析

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23790251
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生理学一般
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 蓑部 悦子 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教 (00448581)
• 研究協力者: 森 誠之 京都大学, 大学院・工学研究科, 准教授 (80342640)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: カルシウムチャネル / カルモジュリン / パッチクランプ法 / inside-out / ATP / run-down / リン酸化

研究概要

L 型 Ca チャネルとその変異体の活性を inside-out パッチ法を用いて比較し、カルモジュリン(CaM)による調節について検討した。野生型チャネルは、CaM+ATP または CaM+オカダ酸で同程度の活性を示した。変異体チャネルでは、ATP がチャネルの slow な不活性化を抑制し、活性を維持するのに対し、オカダ酸による効果は認められなかった。このことから ATP の作用はリン酸化に関連するものではないこと、オカダ酸は、変異体にはないチャネル C 末端遠位部による作用を抑制することが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Calpastatin L is a partial agonist of the calmodulin-binding site for channel activation in Cav1.2 Ca^ channels (2011)
  • 著者名/発表者名: Etsuko Minobe, Hadhumulya Asmara, Zahangir A. Saud, Masaki Kameyama
  • 雑誌名: The journal of biological chemistry 巻: Vol. 286, No. 45 ページ: 39013-39022
  • DOI: DOI:10.1074/jbc.M111.242248
  • 査読あり
• [学会発表] PKA modulate the Ca^-channel activity induced by calmodulin in guinea-pig ventricular myocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Jianjun Xu, Etsuko Minobe, Lei Yang, Lifeng Yu, Asako Kameyama, Kazuto Yazawa, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130327-29
• [学会発表] ATP directly binds to cardiac Ca^(Cav1.2) channels (2013)
  • 著者名/発表者名: Rui Feng, Jianjun Xu, Etsuko Minobe, Asako Kameyama, Li-Ying Hao, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130327-29
• [学会発表] Cav1.2 Ca^チャネルに ATP が直接結合する (2012)
  • 著者名/発表者名: 封 瑞、徐 建軍、蓑部 悦子、亀山 亜砂子、はお 麗英、亀山 正樹
  • 学会等名: 生理学研究所研究会
  • 発表場所: 岡崎
  • 年月日: 20121121-22
• [学会発表] Phosphorylation state determines calmodulin-induced activity of Cav1.2 Ca^channels (2012)
  • 著者名/発表者名: Li-Feng Yu, Jian-jun Xu, Etsuko Minobe, Lei Yang, Asako Kameyama, Kazuto Yazawa, Li-Ying Hao, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第63回西日本生理学会
  • 発表場所: 大分
  • 年月日: 20121019-20
• [学会発表] Mechanism underlying the modulation of L-type Ca^ vhannel by hydrogen peroxide in guinea-pig ventriculafr myocytes (2012)
  • 著者名/発表者名: Lei Yang, Jianjun Xu, Etuko Minobe, Rui Feng, Asako Kameyama, Kazuto Yazawa, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第89回日本生理学会大会
  • 発表場所: 松本
  • 年月日: 20120329-31
• [学会発表] Competitive regulation by calpastatin and calmodulin on Cav1.2 Ca^channel activity (2012)
  • 著者名/発表者名: Etsuko Minobe, Hadimulya Asmara, Zahangir A. Saud, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第89回日本生理学会大会
  • 発表場所: 松本
  • 年月日: 20120329-31
• [学会発表] Multiple functional phosphorylation sites of protein kinase A in the C-terminal tail of Cav1.2 channel (2012)
  • 著者名/発表者名: Etsuko Minobe, Sachiko Maeda, Jianjun Xu, Li-Ying Hao, Rui Feng, Kazuto Yazawa, Asako Kameyama, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第89回日本生理学会大会
  • 発表場所: 松本
  • 年月日: 20120329-31
• [学会発表] Multiple molecules of calmodulin are involved in the regulation of Cav1.2 channel (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaki Kameyama, Etsuko Minobe, Hadhimulya Asmara, Zahangir A. Saud, Dong-yun Han, Jian-Jun Xu, Asako Kameyama and Li-ying Hao
  • 学会等名: The Japan-Korea Joint Symposium on Brain Sciences, and Cardiac and Smooth Muscles
  • 発表場所: 慶州
  • 年月日: 20120217-19
• [学会発表] ヒト神経細胞を用いたISS-Kibo 宇宙実験 (2012)
  • 著者名/発表者名: 馬嶋 秀行、犬童 寛子、鈴木 ひろみ、石岡 憲昭、富田 和男、桝田 大輔、蓑部 悦子、亀山 正樹、岸田 昭世、矢野 幸子、永松 愛子、谷垣 文章、島津 徹、今岡 朝世、柴田 恭子、安孫子 宜光
  • 学会等名: 宇宙利用シンポジウム(第28回)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20120123-24
• [学会発表] カルパスタチンの L 領域は、Cav1.2 Ca^チャネルのカルモジュリンによる活性化部位の部分アゴニストとして働く (2011)
  • 著者名/発表者名: 蓑部 悦子、Hadhimulya Asmara、Zahangir A. Saud、亀山 正樹
  • 学会等名: 生理学研究所研究会
  • 発表場所: 岡崎
  • 年月日: 20111129-30
• [学会発表] Effects of 14 and 28 days exposure of human neuro cells in Space; Neuro Rad Experiments (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroko P. Indo, Noriaki Ishioka, Hiromi Suzuki, Toru Shimazu, Sachiko Yano, Fumiaki Tanigaki, Aiko Nagamatsu, Daisuke Masuda, Etsuko Minobe, Masaki Kameyama, Hideyuki J. Majima
  • 学会等名: SFRBM's 18th Annual Meeting
  • 発表場所: Atlanta
  • 年月日: 20111116-20
• [学会発表] 宇宙放射線および微小重力がヒト神経細胞に及ぼす影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 馬嶋 秀行、犬童 寛子、富田 和男、石岡 憲昭、鈴木 ひろみ、島津 徹、矢野 幸子、谷垣 文章、永松 愛子、桝田 大輔、今岡 朝世,柴田 恭子,安孫子 宜光、蓑部 悦子、亀山 正樹
  • 学会等名: 宇宙生物科学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111030-1101
• [学会発表] CaMKII-dependent and independent facilitation of L-tyep Ca2+channels by hydrogen peroxide in guinea-pig ventricular myocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Lei Yang, Jianjun Xu, Etsuko Minobe, Rui Feng, Asako Kameyama, Kazuto Yazawa, Masaki Kameyama
  • 学会等名: 第62回西日本生理学会
  • 発表場所: 佐賀
  • 年月日: 20111014-15
• [学会発表] Facilitation of L-type Ca^ channels by hydrogen peroxide in guinea-pig ventricular myocytes. The joint conference of SFRR-Asia (2011)
  • 著者名/発表者名: Lei Yang, Jianjun Xu, Etsuko Minobe, Rei Feng, Asako Kameyama, Kazuto Yazawa, Masaki Kameyama
  • 学会等名: ASMRM and J-mit
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 20110830-0904
• [学会発表] 宇宙放射線および微重力が哺乳細胞に及ぼす影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 犬童 寛子、石岡 憲昭、鈴木 ひろみ、島津 徹、矢野 幸子、谷垣 文章、舛田 大輔、蓑部 悦子、亀山 正樹、馬嶋 秀行
  • 学会等名: 第64回日本酸化ストレス学会学術集会
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 20110702-03
• [学会発表] ヒト神経様 SK-N-SH 細胞の国際宇宙ステーションに滞在における影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 馬嶋 秀行、犬童 寛子、宮田 和男、石岡 憲昭、鈴木 ひろみ、島津 徹、矢野 幸子、谷垣 文章、永松 愛子、舛田 大輔、今岡 朝世、柴田 恭子、安孫子 宜光、蓑部 悦子、亀山 正樹
  • 学会等名: 第2回国際放射線神経生物学会大会
  • 発表場所: 群馬
  • 年月日: 2011-12-03
• [備考]
  • URL: http://www.kufm.kagoshima-u.ac.jp/~physiol2/