| 研究概要 |
線虫においてDMドメイン型転写因子MAB-3がGATA転写因子、ELT-2標的遺伝子の転写抑制を介して酸化ストレス耐性の性差に関与することをこれまでに見出した。そこで、MAB-3がどのようにELT-2を抑制するかを明らかにするため最初にMAB-3とELT-2の相互作用をin vitroで検討した。その結果、MAB-3とELT-2の相互作用はみられなかった。続いて、MAB-3がELT-2の転写機能を抑制する機構を明らかにするために、これまでに同定したMAB-3およびELT-2の標的遺伝子のプロモーターに着目し、線虫ゲノムDNAよりmtl-1, mrp-5, F28A12.4各遺伝子のプロモーターを単離し、GFPをレポーター遺伝子とするレポータープラスミドを作成した。同時に、これらプロモーターのMAB-3結合部位に変異を導入した変異型のレポータープラスミドを作成した。これらレポーターを線虫に導入し、トランスジェニック個体を得た。続く解析によりMAB-3によるELT-2転写機能の抑制機構を明らかにする。 哺乳動物に保存されるDMRT遺伝子は7種類報告されている。これらの発現について体細胞レベルで性差がみられるかを、雌雄マウスの臓器における各DMRT遺伝子の発現をRT-PCRにより解析した。その結果、肝臓、脳等でDMRT遺伝子は雌雄ともに発現せず、あるいは雌雄での発現に差はみられなかった。いっぽう心臓においてDMRT1, DMRT2, DMRT3各遺伝子の発現が雄でのみ観察された。また、線虫でレポーター遺伝子として用いることが可能であるmtl-1の哺乳動物ホモログであるMT1の発現に性差が生じるかを、雌雄マウスの各臓器を用いて比較した。その結果、複数の臓器でその発現に性差が確認された。
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