ｃＭｅｔ／ＨＧＦ受容体ＯＮ－ＯＦＦ機能変換を介した再生・病態・発癌制御の研究

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23790327
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 中村 隆弘 金沢大学, がん進展制御研究所, 助教 (70414018)
• キーワード: HGF / Met / 組織再生 / シグナル伝達 / 肝細胞増殖因子

研究概要

本研究は、juxtamembrane（JM）ドメインを介したMet/HGF受容体依存的形態形成やキナーゼ制御の解析、形態形成・再生異常や病態・発癌の解析を行い、増殖因子受容体に備わっている自己抑制機能のメカニズムと意義を明らかにすることを目的とする。本年度は、化合物（ダイマライザー）によって人工的に目的蛋白質（cMet）を二量体化ならびに活性化させることのできるシステムを用い、WT MetあるいはJMドメイン欠損変異Metを発現させた細胞を用いたシグナル活性化制御の生化学的解析に取り組んだ。
WT MetあるいはJMドメイン欠損変異Metの細胞内領域と二量体形成ユニット（FKBP）とを融合させたキメラ蛋白質（FKBP-Met）を発現させるための構築を完成させた。FKBP-Met WTを導入されたHCC827細胞は、ダイマライザー添加によるMetシグナルの活性として、イレッサ存在中において、AktやErkの活性化が認められた。一方、JMドメイン欠損変異Metの細胞内領域と二量体形成ユニットとを融合させたキメラ蛋白質を導入されたHCC827細胞はダイマライザー添加によって、イレッサ存在中において、AktやErkの活性化が認められたが、その大きさや持続性はFKBP-Met WTを導入されたもの同程度であった。したがって、本システムを用いた場合、MetのJMドメインがON-OFF機構を担う領域であるという仮説はネガティブな結果となった。一方、強制発現させたFKBP-Metは既に高レベルでリン酸化されている一方、AktやErkの活性化は認められず、ダイマライザー添加によるFKBP-Metの二量体化によって初めてAktやErkの活性化が認められた。この結果は、Metが生物活性を発現するためにはリン酸化されるだけでは不十分であり、二量体化されることが不可欠であることを示すものである。

研究成果

• [雑誌論文] HGF regulates VEGF expression via the c-Met receptor downstream pathways, PI3K/Akt, MAPK and STAT3, in CT26 murine cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumura A, Kubota T, Taiyoh H, Fujiwara H, Okamoto K, Ichikawa D, Shiozaki A, Komatsu S, Nakanishi M, Kuriu Y, Murayama Y, Ikoma H, Ochiai T, Kokuba Y, Nakamura T, Matsumoto K, and Otsuji E
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: Vol. 42: no.2 ページ: 535-542
  • DOI: DOI:10.3892/ijo.2012.1728
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dual inhibition of Met kinase and angiogenesis to overcome HGF-induced EGFR-TKI resistance in EGFR mutant lung cancer (2012)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi S, Wang W, Li Q, Yamada T, Kita K, Donev IS, Nakamura T, Matsumoto K, Shimizu E, Nishioka Y, Sone S, Nakagawa T, Uenaka T, and Yano S
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: Vol. 181: no.3 ページ: 1034-1043
  • DOI: DOI:10.1016/j.ajpath.2012.05.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Paracrine Receptor Activation by Microenvironment Triggers Bypass Survival Signals and ALK Inhibitor Resistance in EML4-ALK Lung Cancer Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamada T, Takeuchi S, Nakade J, Kita K, Nakagawa T, Nanjo S, Nakamura T, Matsumoto K, Soda M, Mano H, Uenaka T, and Yano S
  • 雑誌名: Clinical Cancer Research 巻: Vol. 18: no.13 ページ: 3592-3602
  • DOI: DOI:10.1158/1078-0432.CCR-11-2972
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hsp90 Inhibition Overcomes HGF Triggering Resistance to EGFR-TKIs in EGFR-Mutant Lung Cancer by Decreasing Client Protein Expression and Angiogenesis (2012)
  • 著者名/発表者名: Koizumi H, Yamada T, Takeuchi S, Nakagawa T, Kita K, Nakamura T, Matsumoto K, Suda K, Mitsudomi T, and Yano S
  • 雑誌名: Journal of Thoracic Oncology 巻: Vol. 7: no.7 ページ: 1078-1085
  • DOI: DOI:10.1097/JTO.0b013e3182519a2c
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combined therapy with mutant-selective EGFR inhibitor and Met kinase inhibitor for overcoming erlotinib resistance in EGFR-mutant lung cancer (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa T
  • 雑誌名: Mol Cancer Ther. 巻: 11 ページ: 2149-2157
  • DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-12-0195
  • 査読あり
• [学会発表] 肺がん細胞を用いたWnt/beta-cateninシグナル抑制におけるKremen1の機能解析
  • 著者名/発表者名: 中村隆弘
  • 学会等名: 日本癌学会学術総会
  • 発表場所: ロイトン札幌（札幌）
• [備考] 金沢大学がん進展制御研究所腫瘍動態制御研究分野
  • URL: http://www.kanazawa-u.ac.jp/~ganken/shuyoudoutaiseigyo/index.html