抗ＨＭＧＢ１抗体を用いた広域スペクトル抗腫瘍薬の開発とその作用機序の解明

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23790601
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 和氣 秀徳 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (60570520)
• キーワード: 抗体医薬 / 抗腫瘍薬 / HMGB1

研究概要

担癌マウスに静脈内投与によりラット由来抗HMGB1抗体を投与したところアナフィラキシーを起こし死亡したため、SCIDマウス(免疫不全マウス)で抗体効果を観察したが抗腫瘍効果が見られず、投与方法は最初に設定したオスモティックポンプによる投与に決定した。しかしながら、この方法であるとオスモティックポンプからの投与量が少なく、抗腫瘍効果も弱かった。この為、投与方法を腫瘍内投与に変更してみたが、ラット由来の抗体を顕著な抗腫瘍効果が現れるまで投与するとやはりアナフィラキシーショックが起こった。
以上の理由より、この問題を根本的に解決するにはマウス由来の抗HMGB1抗体を作製しなければならないと考え、マウスモノクローナル抗体作製に着手した。抗体作製には免疫を行うための抗原が大量に必要になる為、バキュロウイルス発現系を用いてHisタグ付きリコンビナントHMGB1を強制発現させた、さらにNi-NTAアガロースゲルを用いてアフィニティ精製を行い精製リコンビナントHMGB1を得た。この操作を抗体作製に必要となる量が取れるまで繰り返した。今後、この抗原を免疫しマウス由来のモノクローナル抗体を作製していく。

研究成果

• [雑誌論文] Histamine inhibits high mobility group box 1-induced adhesion molecule expression on human monocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Sadamori H, Teshigawara K, Niwa A, Liu K, Wake H, Mori S, Yoshino T, Nishibori M
  • 雑誌名: Eur J Pharmacol 巻: 718 ページ: 305-313
  • DOI: 10.1016/j.ejphar.2013.08.017
  • 査読あり
• [学会発表] コラゲナーゼ誘発脳内出血モデルにおける抗HMGB1単クローン抗体の効果 (2014)
  • 著者名/発表者名: 劉克約、王登莉、和氣秀徳、勅使川原匡、髙橋英夫、森秀治、西堀正洋
  • 学会等名: 第87回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台国際センター
  • 年月日: 20140319-20140321
• [学会発表] Anti-HMGB1 Monoclonal Antibody Therapy for Traumatic Brain Injury in Rats (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishibori M, Okuma Y, Liu K, Wake H, Maruo T, Teshigawara K, Yamamoto Y, Yamamoto H, Ohtsuka A, Yoshino T, Otani N, Tomura S, Shima K, Takahashi H, Date I, Mori S
  • 学会等名: Merinoff World Congress 2013：HMGB1
  • 発表場所: Feinstein Institute for Medical Research, New York, USA
  • 年月日: 20131009-20131011
• [学会発表] Protection of BBB disruption in ischemic and traumatic injuries by anti-HMGB1 monoclonal antibody (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishibori M, Liu K, Okuma Y, Wake H, Teshigawara K, Takahashi H, Date I, Mori S
  • 学会等名: Signalling in the Blood-Brain Barriers
  • 発表場所: Hotel Kapitány,Sümeg, Hungary
  • 年月日: 20130912-20130914