| 研究概要 |
本年はin vivo実験を中心に解析を行った。
【方法】健常人由来CD34陽性細胞（EPC）はAllCells社より購入し実験に用いた。EPCはVEGF, SCF, IL-6, Flt-3 ligand, TPOを添加したStemSpan-SFEM培地にて7日間培養した。肝硬変症動物実験モデルは、免疫不全ラット腹腔内に週2回3週間四塩化炭素（CCl4）を投与し作製した。その後、脾臓より生食水あるいはCD34陽性細胞を低・中・高用量群と3群に分けて投与した。その後もCCl4は投与し続け、CCl4投与開始後43日目に屠殺し、肝線維化・肝再生の評価を行った。
【結果】生体内に移植した増幅EPCは、CD31+細胞（血管内皮細胞、類洞内皮細胞）あるいはSM1+細胞（血管平滑筋細胞）へ分化した。Azan染色および抗collagen-I抗体による免疫組織化学染色による線維化率は、増幅EPC投与群で有意に低値であり、移植細胞数依存性に線維化の進展が阻止された。Ki67陽性肝細胞率は増幅EPC投与群で明らかに増加し、その効果は増幅前EPC移植群と比較し、全用量群において増幅後EPC群の方がより細胞増殖活性作用を示した。
【結論】CD34+細胞を増幅することにより血管新生、組織修復能を高める因子の増加を確認した。動物実験モデルを用いた治療効果も示されたことより、臨床応用への効果を期待したい。
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