家兎における血管内皮リパーゼ阻害・過剰発現の血清脂質と動脈硬化に及ぼす効果の検討

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23790854
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 孫 麗 神戸大学, 大学院・医学研究科, 医学研究員 (10547508)
• 連携研究者: 石田 達郎 神戸大学, 医学部附属病院, 准教授 (00379413) ; 安田 知行 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (20457047)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 高比重リポ蛋白 / 炎症 / 脂質代謝 / 血管内皮 / リパーゼ / 動脈硬化 / 家兎

研究概要

比重リポ蛋白コレステロール(HDL-C) は、冠動脈疾患における負の危険因子で新たな治療標的である。血管内皮リパーゼ(EL) は血清 HDL-C 値の規定因子であり、HDL 増加療法の分子標的として期待されている。本研究は、ヒトに近い脂質代謝機構を有する家兎において、抗 EL ワクチンおよび EL 遺伝子導入により EL を阻害・活性化し、EL が HDL 増加療法の分子標的として適当かどうかを評価した。ヒト EL を組込んだアデノウイルスを日本白色家兎の耳静脈より注射し、EL を過剰発現させたところ、一過性に家兎においても最大 70%のHDL-C 値低下を確認できた。血清アポ A-I 濃度や血清 LDL-C 濃度、中性脂肪濃度には変化は認めなかったが、血清のパラオキソナーゼ活性は EL 過剰発現により有意に減少した。血清中のアポ蛋白 A-I 値は維持されたため、EL過剰発現後も血清のコレステロール引抜き能は残存していた。一方、EL の Lid または活性中心のペプチドと、tetanus toxin(TT) の一部を fusion させたキメラペプチド(TT/EL ワクチン) を合成し、家兎に免疫し、抗 EL 中和抗体を誘導することにより EL 阻害モデルの作製を試みた。複数の TT/EL ワクチンの効果を検討したが、抗体は誘導されるものの血清脂質には影響を及ぼさなかった。EL 阻害の方法と効果については現在も検討中で、今後は EL 阻害薬や新規の阻害抗体を用いた評価が必要であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Endothelial lipase modulates pressure overload-induced heart failure through alternative pathway for fatty acid uptake (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakajima H, Ishida T, Satomi-Kobayashi S, Mori K, Hara T, Sasaki N, Yasuda T, Toh R, Tanaka H, Kawai H, Hirata K
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 61(5) ページ: 1002-7
• [雑誌論文] Fasting serum concentration of apolipoprotein B48 represents residual risks in patients with new-onset and chronic coronary artery disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Mori K, Ishida T, Yasuda T, Monguchi T, Sasaki M, Kondo K, Hasokawa M, Nakajima H, Haraguchi Y, Sun L, Shinohara M, Toh R, Nishimura K, Hirata K
  • 雑誌名: Clin Chim Acta 巻: 421C ページ: 51-56
  • DOI: DOI:10.1016/j.cca.2013.02.005
• [雑誌論文] Enzyme-linked immunosorbent assay system for human endothelial lipase (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishida T, Miyashita K, Shimizu M, Kinoshita N, Mori K, Sun L, Yasuda T, Imamura S, Nakajima K, Stanhope KL, Havel PJ, Hirata K
  • 雑誌名: Clin Chem 巻: 58(12) ページ: 1656-64
  • DOI: DOI:10.1373/clinchem.2012.187914
• [雑誌論文] Expression of endothelial lipase correlates with the size of neointima in a murine model of vascular remodeling (2012)
  • 著者名/発表者名: Sun L, Ishida T, Okada T, Yasuda T, Hara T, Toh R, Shinohara M, Yamashita T, Rikitake Y, Hirata K
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 巻: 19(12) ページ: 1110-27
• [雑誌論文] Identification of biomarkers of stent restenosis with serum metabolomic profiling using gas chromatography/mass spectrometry (2012)
  • 著者名/発表者名: Hasokawa M, Shinohara M, Tsugawa H, Bamba T, Fukusaki E, Nishiumi S, Nishimura K, Yoshida M, Ishida T, Hirata K
  • 雑誌名: Circ J 巻: 76(8) ページ: 1864-73
• [雑誌論文] Endothelial lipase mediates HDL levels in normal and hyperlipidemic rabbits (2012)
  • 著者名/発表者名: Zhang J, Yu Y, Nakamura K, Koike T, Waqar AB, Zhang X, Liu E, Nishijima K, Kitajima S, Shiomi M, Qi Z, Yu J, Graham MJ, Crooke RM, Ishida T, Hirata KI, Hurt-Camejo E, Chen YE, Fan J
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 巻: 19(3) ページ: 213-26
• [雑誌論文] Pitavastatin increases HDL particles functionally preserved with cholesterol efflux capacity and anti-oxidative action in dyslipidemia patients
  • 著者名/発表者名: Sasaki-Miyamoto M, Yasuda T, Monguchi T, Nakajima H, Mori K, Toh R, Ishida T, Hirata K
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 巻: 掲載確定
• [学会発表] Effect of overexpression of endothelial lipase on HDL metabolism and HDL anti-atherogenic properties in rabbits (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasuda T, Ishida T, Mori K, Hirata K
  • 学会等名: 第77回日本循環器学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-15
• [学会発表] Generation of a high-sensitive and reliable ELISA system that can quantitatively measure human serum mass of endothelial lipase (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮下かずや、石田達郎、安田知行、孫麗、木下憲明、中嶋克行、平田健一
  • 学会等名: 第44回日本動脈硬化学会総会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-07-15
• [学会発表] 血管内皮リパーゼ特異的酵素活性と血清HDLコレステロールおよび冠動脈疾患との関連性の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 孫麗、石田達郎、森健太、安田知行、中島英人、破磯川実、原口英子、佐々木真希、近藤健介、平田健一
  • 学会等名: 第12回日本NO学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2012-06-29
• [学会発表] Plasma mass and activity of endothelial lipase are associated with coronary risk factors in humans (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishida T, Mori K, Sun L, Yasuda T, Hirata K
  • 学会等名: The XVI International Symposium on Atherosclerosis (ISA2012)
  • 発表場所: Sydney, Australia
  • 年月日: 2012-03-27
• [学会発表] 糖尿病性動脈硬化における脂質異常の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石田達郎
  • 学会等名: 第26回日本糖尿病合併症学会総会
  • 発表場所: 大宮
  • 年月日: 2011-10-14
• [学会発表] Role of endothelial lipase in HDL metabolism and atherosclerosis in humans (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishida T, Toh R, Sun L, Yasuda T, Hirata K
  • 学会等名: 79th European Atherosclerosis Society Congress
  • 発表場所: Gothenburg, Sweden.
  • 年月日: 2011-06-28