| 研究課題/領域番号 |
23790998
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
佐野 和憲 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (50534343)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| キーワード | プリオン / 孤発性クロイツフェルトヤコブ病 / dsRNA / 感染 |
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| 研究概要 |
プリオン病は、各動物種に定常的に発現する正常型プリオンタンパク（PrPC）から構造変換した異常型プリオンタンパク（PrPSc）が中枢神経系にアミロイドとして蓄積し発症するとされている。本研究は、PrPCからPrPScへの構造変換過程に関わるプリオンタンパク以外の因子を同定し、その作用メカニズムを解析することにより、現在全く分かっていない、孤発性クロイツフェルトヤコブ病においてプリオンが自然発生する機構を解明することが目的である。 我々は、プリオン増殖に関わる因子として二本鎖RNA（dsRNA）に注目し、PrPCからPrPScへの変換に対する作用を検討した。PrPCと同じ構造を持つ大腸菌から精製したリコンビナントPrPを、試験管内で間欠的に撹拌することによって異常型に高い効率で変換する方法（Quaking-Induced Conversion; QUIC）を用いて検討したところ、dsRNAは異常型への構造変換を促進した。また、神経由来培養細胞を用いたex vivo実験系におけるプリオン感染によるPrPSc蓄積に対しても、dsRNAはPrPSc蓄積を増大した。一方、一本鎖RNA（ssRNA）は、PrPSc蓄積に影響しなかった。以上の結果から、dsRNAは、試験管内、培養細胞を用いたex vivo実験系において、PrPCからPrPScへの変換を促進することが明らかとなり、dsRNAがプリオン病に関わる因子の一つであることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
試験管内、培養細胞を用いたex vivo実験系において、プリオン増殖に関わる因子を特定でき、現在その作用機序を解明するために実験を行っているから。さらに今後、実験動物を用いたin vivo実験系へ展開できうると考えているから。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、プリオン増殖に関わるdsRNA以外の因子はいまだ同定できていない。そこで今後は、dsRNAの作用機序を解明する実験を重点的に行い、孤発性クロイツフェルトヤコブ病とdsRNAとの関連について検証する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
次年度は、dsRNAのプリオン増殖に関わるシグナル経路を明らかにしたいと考えているので、そのためにプラスミド、遺伝子導入試薬、抗体、酵素などの生化学試薬類が必要となる。さらに、in vivo実験においてdsRNAと孤発性クロイツフェルトヤコブ病との関連を検証するために実験用マウスを使用する。また、国内、海外の学会での成果発表と論文発表のための費用も必要となる。
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