グリオーマの発生に関わる変異型ＩＤＨ１／２の病態生理学的解析とその臨床応用

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23791584
• 研究機関: 山形大学
• 研究代表者: 加藤 幸成 山形大学, 医学部, その他 (00571811)
• キーワード: モノクローナル抗体 / IDH1 / IDH2 / 変異型IDH1/2 / グリオーマ / R132H / R132S / 免疫組織染色

研究概要

イソクエン酸脱水素酵素（IDH）は、WHO分類のグレードII、IIIのグリオーマやsecondary glioblastomaにおいて高頻度に点突然変異が生じることが報告された。一方、primary glioblastomaではほとんど変異が検出されない。また、酵素活性中心であるIDH1の132番目のアルギニン（R132）、IDH2の172番目のアルギニン（R172）に変異が集中しており、変異型IDH1/2はイソクエン酸をα-ケトグルタル酸に変換する活性を失うだけでなく、α-ケトグルタル酸を2-ヒドロキシグルタル酸（2-HG）に変換する新しい酵素活性を得ることが報告された。臨床的に重要なことには、野生型IDH1/2と比べ、変異型IDH1/2を保持するグリオーマの予後は格段に良く、グリオーマの予後診断マーカーとして有用である。本研究において、変異型IDH1/2に対する特異的モノクローナル抗体を樹立し、グリオーマの予後診断マーカーとして確立することを目的とした。まず、変異型IDH1で最も頻度の高いR132Hに対する抗体（HMab-1; mouse IgG1）を樹立した。HMab-1は野生型IDH1を認識せず、R132Hのみを特異的に認識することを、ELISA法、Western-blot法にて確認した。また、HMab-1は、R132H陽性のグリオーマに対する免疫組織染色にて腫瘍細胞特異的に反応し、血管内皮細胞などの正常細胞には反応しなかった。次に、比較的頻度の高いR132Sに対する抗体（SMab-1; mouse IgG1）を樹立した。SMab-1も同様に、ELISA法、Western-blot法、免疫組織染色にて、R132Sのみを特異的に認識した。これらの変異型抗体を組み合わせてグレードIII症例の生存曲線解析を行うと、IDH1変異が予後良好因子となることがわかった。

研究成果

• [雑誌論文] Progressive adult primary glioblastoma in the medulla oblongata with an unmethylated MGMT promoter and without an IDH mutation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa A, Nakada M, Watanabe T, Hayashi Y, Sabit H, Kato Y, Suzuki S, Ooi A, Sato H, Hamada JI.
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutated IDH1 is a favorable prognostic factor for type 2 gliomatosis cerebri. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kwon MJ, Kim ST, Kwon MJ, Kong DS, Lee D, Park S, Kang SY, Song JY, Nam DH, Kato Y, Choi YL, Suh YL.
  • 雑誌名: Brain Pathol. 巻: 22(3) ページ: 307-317
  • DOI: 10.1111/j.1750-3639.2011.00532.x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemical detection of IDH1 mutation, p53, and internexin as prognostic factors of glial tumors. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takano S, Kato Y*, Yamamoto T, Kaneko MK, Ishikawa E, Tsujimoto Y, Matsuda M, Nakai K, Yanagiya R, Morita S, Tsuboi K, Matsumura A.
  • 雑誌名: J Neurooncol. 巻: 108(3) ページ: 361-373
  • DOI: 10.1007/s11060-012-0837-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemical analysis-based proteomic subclassification of newly diagnosed glioblastomas with integrated genomic and epigenetic profiles (2012)
  • 著者名/発表者名: Motomura K, Natsume A, Watanabe R, Ito I, Kato Y, Momota H, Nishikawa R, Mishima K, Nakasu Y, Abe T, Namba H, Nakazato Y, Tashiro H, Takeuchi I, Mori T, Wakabayash T.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 103(10) ページ: 1871-1879
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2012.02377.x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chimeric anti-podoplanin antibody suppresses tumor metastasis via neutralization and antibody-dependent cellular cytotoxicity (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaneko MK, Kunita A, Abe S, Tsujimoto Y, Fukayama M, Goto K, Sawa Y, Nishioka Y, Kato Y*.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 103 (11) ページ: 1913-1919,
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2012.02385.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemical Examination of Novel Rat Monoclonal Antibodies against Mouse and Human Podoplanin. (2012)
  • 著者名/発表者名: Chiaki Kaj, Yuta Tsujimoto, Mika Kato Kaneko, Yukinari Kato*, and Yoshihiko Sawa*.
  • 雑誌名: Acta Histochm. Cytochem 巻: 45 (4) ページ: 227-237
  • DOI: 10.1267/ahc.12008
  • 査読あり
• [雑誌論文] The expression of podoplanin and classical cadherins in the brain (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaji C, Tomooka M, Kato Y, Kojima H, Sawa Y
  • 雑誌名: J Anat. 巻: 220(5) ページ: 435-446
  • DOI: 10.1111/j.1469-7580.2012.01484.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Podoplanin expression in advanced atherosclerotic lesions of human aortas (2012)
  • 著者名/発表者名: Hatakeyama K, Kaneko MK, Kato Y*, Ishikawa T, Nishihira K, Tsujimoto Y, Shibata Y, Ozaki Y, Asada Y.
  • 雑誌名: Thromb. Res. 巻: 129 ページ: 70-76
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2012.01.003
  • 査読あり
• [学会発表] グリオーマの予後診断マーカーとして有用な変異型IDH1/2に対する特異的抗体の開発
  • 著者名/発表者名: 加藤幸成
  • 学会等名: 第32回日本分子腫瘍マーカー研究会
  • 発表場所: さっぽろ芸文館（札幌市）
• [備考] 東北大学大学院医学系研究科・加藤研究室
  • URL: http://www.med-tohoku-antibody.com/