本研究は、培養癌細胞を初期化することにより、癌治療を困難なものとしている原因とされている癌幹細胞のモデルを作成し、正常細胞に影響のない新たな治療を確立することを目的としている。平成24年度は、京都大学iPS細胞研究所(CIRA)のプロトコール(エピソーマルベクターを用いたヒトiPS細胞樹立プロトコール)を参考として、主に、培養癌細胞のiPS細胞化を試みた。 具体的には、本研究では、効率よく遺伝子導入が可能なエレクトロポーレーション法を用いるが、最適な出力条件は細胞により様々であり、線維芽細胞を対象としているCIRAのプロトコールにある条件のままでは、期待する結果が得られなかった。したがって、細胞毎に良好な遺伝子導入効率が確認できる条件を詳細に検討した。また、研究をすすめていく過程で、遺伝子導入に用いるベクターの純度が、iPS細胞作成において非常に重要であることが確認されたため、ベクターの精製方法を検討し、エンドトキシンレベルの低い、高純度のベクターを調製した。 以上の工夫を行ったことで、培養癌細胞のiPS細胞化の手技を確立しつつある状況に至った。
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