ｓｉＲＮＡ技術を用いた遺伝子治療研究

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23792014
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 五十嵐 勉 日本医科大学, 医学部, 講師 (10421190)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: 網膜 / 遺伝子治療 / AAVベクター / siRNA / VEGF / 脈絡膜新生血管

研究概要

マウスにおける遺伝子VEGFに対するsiRNAの配列についてデザインの決定を行った。選択された配列の遺伝子をAAV type8ベクターのベクタープラスミドに挿入した。ライゲーション、トランスフォーメーションを行って、クローンの単離を行った。クローンのシークエンスを確認し、プラスミドを精製後、発現を培養細胞にて確認後、AAV type8ベクターを作製した。次にAAV type8ベクターの発現を培養細胞にて確認後、ラージスケールにてベクターを作製し濃縮を行った。動物実験として脈絡膜新生血管モデルにおいて新生血管抑制効果を確認した。2014年度にMolecular vision誌にアクセプトされた。

研究成果

• [雑誌論文] AAV2/8-mediated expression of siRNA targeting VEGF efficiently inhibits neovascularization in a murine choroidal neovascularization model (2014)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake N, Fujimoto C, Yaguchi C, Iijima O, Shimada T, Takahashi H, Miyake K
  • 雑誌名: Molecular Vision 巻: 20 ページ: 488-496
• [雑誌論文] Temperature in the anterior chamber during phacoemulsification (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Oki K, Igarashi T, Shiwa T, Takahashi H
  • 雑誌名: J Cataract Refract Surg
• [雑誌論文] 自発的開瞼維持による涙液浸透圧の変化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 一戸唱、五十嵐勉、藤本千明、飯島修、小野眞史、高橋浩
  • 雑誌名: あたらしい眼科2014 巻: 31(2) ページ: 257-259
• [雑誌論文] Direct comparison of the administration routes for AAV8-mediated ocular gene therapy (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake K, Asakawa N, Miyake N, Shimada T, Takahashi H
  • 雑誌名: Current eye research 巻: 38(5) ページ: 569-577
• [雑誌論文] Simultaneous treatment of pterygium and temporal conjunctivochalasis (2013)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Shiwa T, Oharazawa H, Igarashi T, Takahashi H
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 80(1) ページ: 74-77
• [雑誌論文] Intravenous cyclophosphamide pulse therapy in Japanese children with systemic lupus erythematosus (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Igarashi T, Shimizu A, Itoh Y
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 80(5) ページ: 396-400
• [雑誌論文] Seroconversion of hepatitis B envelope antigen by entecavir in a child with hepatitis B virus–related membranous nephropathy (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Shimizu A, Igarashi T, Hanaoka K, Yoshizaki K, Shigemori T, Shimizu S, Komeichi H, Itoh Y
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 80(5) ページ: 387-395
• [雑誌論文] A definitive diagnosis of mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma made at a second biopsy examination (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Shimizu A, Yamaguchi H, Fukushima Y, Igarashi T, Takahashi H
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 80 (6) ページ: 475-480
• [雑誌論文] Rapid and Transient Upregulation of CCL11 (Eotaxin-1) in Mouse Ovary During Terminal Stages of Follicular Development (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuwabara Y, Katayama A, Igarashi T, Tomiyama R, Piao H, Kaneko R, Abe T, Mine K, Akira S, Orimo H, Takeshita T
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol 巻: 67(5) ページ: 358-368
• [雑誌論文] A case of juvenile Sjögren's syndrome with interstitial nephritis (2012)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Itoh Y, Shimizu A, Igarashi T, Yoshizaki K, Fukunaga Y
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 79(4) ページ: 286-290
• [雑誌論文] Mometasone Furoate Nasal Spray Relieves the Ocular Symptoms of Seasonal Allergic Rhinoconjunctivitis (2012)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Nakazato Y, Kunishige T, Fujita M, Yamada Y, Fujimoto C, Okubo K, Takahashi H
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 79 (3) ページ: 182-189
• [雑誌論文] A new mutation in RP1L1 gene in occult macular dystrophy patient associated with a depolarizing-pattern of focal macular ERG (2012)
  • 著者名/発表者名: Kabuto T, Takahashi H, Goto-Fukuura Y, Igarashi T, Akahori M, Kameya S, Iwata T, Mizota A, Yamaki K, Miyake Y, Takahashi H
  • 雑誌名: Molecular Vision 巻: 18 ページ: 1031-1039
• [雑誌論文] Mean hemoglobin levels in venous blood samples and prevalence of anemia in Japanese elementary and junior high school students (2012)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Itoh Y, Maeda M, Igarashi T, Fukunaga Y
  • 雑誌名: Journal of Nippon Medical School 巻: 79 (3) ページ: 232-235
• [雑誌論文] 強皮症に随伴した両眼性汎ぶどう膜炎の1例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤景子、堀純子、五十嵐勉、今高之
  • 雑誌名: 臨床眼科 巻: 66(2) ページ: 179-183
• [学会発表] 短時間の超高浸透圧暴露で角膜上皮細胞からのIL-6産生は上昇する (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林舞香、五十嵐勉、藤本千明、高橋浩
  • 学会等名: 日本角膜学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] レバミピド点眼によるドライアイの自覚症状・他覚所見の改善 (2014)
  • 著者名/発表者名: 仲野裕一郎、五十嵐勉、藤田美穂、山田佑美、藤本千明、國重智之、高橋永幸、高橋浩
  • 学会等名: 日本角膜学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] 白内障手術前後における涙液浸透圧の変化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 有馬武志、五十嵐勉、藤田美穂、山田佑美、藤本千明、高橋永幸、國重智之、高橋浩
  • 学会等名: 日本角膜学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] 血漿浸透圧と涙液浸透圧の相関因子について (2014)
  • 著者名/発表者名: 久保田大紀、五十嵐勉、藤田美穂、山田佑美、藤本千明、国重智之、高橋永幸、高橋浩
  • 学会等名: 日本角膜学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] Adeno-associated vector (type 8)-mediated expression of siRNA targeting vascular endothelial growth factor efficiently inhibits neovascularization in a murine choroidal neovascularization model (2014)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake K, Miyake N, Iijima O, Yaguchi C, Yaguchi C, Shimada T, Takahashi H
  • 学会等名: World ophthalmology congress
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] A definitive diagnosis of mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma made at a second biopsy examination (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Igarashi T, Shimizu A, Yamaguchi A, Fukushima Y, Igarashi T, Akeo K, Takahashi H
  • 学会等名: World ophthalmology congress
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] Alteration of tear osmolality by sustained eye opening (2014)
  • 著者名/発表者名: Ichinohe S, Igarashi T, Fujimoto C, Ono M, Takahashi H
  • 学会等名: World ophthalmology congress
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20140000
• [学会発表] Adeno-associated vector (type 8)-mediated expression of siRNA targeting vascular endothelial growth factor efficiently inhibits neovascularization in a murine choroidal neovascularization model (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake K, Miyake N, Iijima O, Yaguchi C, Shimada T, Takahashi H
  • 学会等名: American society of gene therapy
  • 発表場所: Solt lake city
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] siRNA targeting vascular endothelial growth factor by adeno-associated vector (type 8) efficiently inhibits neovascularization in a murine choroidal neovascularization model (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake N, Iijima O, Yaguchi C, Shimada T, Takahashi H, Miyake K
  • 学会等名: Japan society of gene therapy (18th)
  • 発表場所: Okayama
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] siRNA targeting vascular endothelial growth factor by adeno-associated vector (type 8) efficiently inhibits neovascularization in a murine choroidal neovascularization model (2013)
  • 著者名/発表者名: Igarashi T, Miyake N, Iijima O, Yaguchi C, Shimada T, Takahashi H、Miyake K
  • 学会等名: 日本網膜硝子体学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] Bone Marrow Cell Based Enzyme Replacement Prolongs Survival and Improves Disease Phenotypes In a Mouse Model Of Lethal Hypophosphatasia (2013)
  • 著者名/発表者名: Iijima O, Miyake K, Nakamura A, Igarashi T, Kanokoda C, Watanabe A, Shimada T
  • 学会等名: American society of hematology
  • 発表場所: New Orieans
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] 自発的開瞼維持による涙液浸透圧の変化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 一戸唱、五十嵐勉、飯島修、小野眞史、高橋浩
  • 学会等名: 日本角膜学会
  • 発表場所: 和歌山
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] 低フォスファターゼ症マウスに対するex vivo遺伝子治療法の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 飯島修、三宅弘一、中村有希、鹿子田千津、五十嵐勉、渡邉淳、島田隆
  • 学会等名: 第58回日本人類遺伝学会学術集会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20130000
• [学会発表] Rescue of Lethal Hypophosphatasia Mice by Neonatal Ex Vivo Gene Therapy Using Lentivirally Transduced Bone Marrow Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Iijima O, Miyake K, Sugano-Tajima H, Igarashi T, Kanokoda C, Watanabe A, Shimada T
  • 学会等名: American society of hematology
  • 発表場所: Atlanta
  • 年月日: 20120000
• [学会発表] 異なる投与法によるAAVtype8ベクターの遺伝子導入効率と安全性の比較検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 五十嵐勉、三宅弘一、浅川なぎさ、三宅紀子、島田隆、高橋浩
  • 学会等名: 日本網膜硝子体学会
  • 年月日: 20120000