癌幹細胞マーカーとしてのＥｐＣＡＭをターゲットとした口腔癌分子標的治療の研究

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23792360
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 柳本 惣市 長崎大学, 大学病院, 講師 (10315260)
• キーワード: 口腔癌 / EpCAM / 癌幹細胞 / マイクロRNA

研究概要

癌細胞浸潤に関するEpCAMをターゲットとして機能しているmiR-21に注目した。miR-21のターゲットのうち癌細胞浸潤に関与する分子を決定するために，予測プログラムmiRandaを用いた。舌扁平上皮癌細胞において，miR-21を特異的にブロックするLNAプローブを用いてノックダウンし，Matrigel invasion assayとWestern blotで評価し，mi-21が癌細胞浸潤を担っているかどうかを検討した。癌細胞浸潤を担うWntアンタゴニストとしてDKK2を選択した。miR-21のノックダウンでDKK2の発現増加に伴う細胞浸潤能の低下を認めたことから，miR-21は舌扁平上皮癌の治療標的として有用であることが示唆された。具体的には以下の通りである。
1）ポジティブセレクション法で分離された細胞集団はEpCAM強陽性であり，癌幹細胞特性を有していた。またEpCAMを制御すると思われるmiR-21を過剰発現していることから，EpCAMによる口腔癌の浸潤制御の分子機構には，miR-21が関与しているのではないかと考えた。
2）in situ hybridizationにて舌癌組織でmiR-21が過剰発現していることが明らかとなった。さらに浸潤パターンとの相関性が認められた。しかしながら予後因子とは成り得なかった。
3）舌扁平上皮癌細胞において，miR-21を特異的にブロックするLNAプローブを用いてノックダウンし，Matrigel invasion assayとWestern blotで評価し，mi-21が癌細胞浸潤を担っているかどうかを検討したところ，miR-21のノックダウンでDKK2の発現増加に伴う細胞浸潤能の低下を認めたことから，miR-21は舌扁平上皮癌の治療標的として有用であることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Clinicopathological risk factors for local recurrence in oral squamous cell carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Yanamoto, S., Yamada, S., Takahashi, H., Yoshitomi, I., Kawasaki, G., Ikeda H., Minamizato T., Shiraishi, T., Fujita, S., Ikeda, T., Asahina, I., Umeda, M
  • 雑誌名: International Journal of Oral and Maxillofacial Surgery 巻: 41 ページ: 1195-1200
  • DOI: DOI:10.1016/j.ijom.2012.07.011