バイオリサイクルを考慮した過剰埋伏歯由来iPS細胞の樹立効率の検討

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23792364
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 外科系歯学
• 研究機関: 新潟大学 (2012); 鹿児島大学 (2011)
• 研究代表者: 齊藤 陽子 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (30404487)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 小児歯科学

研究概要

一般的にES細胞/iPS細胞の樹立・維持にはfeeder細胞が必要とされる。MEFs細胞とSTO細胞は広くfeeder細胞として使用されている。本研究の目的は、ヒト乳歯(HDDPCs)と過剰歯(SNT)からiPS細胞を樹立することである。HDDPCsとSNT歯髄から初代培養細胞を得て、OCT3/4、SOX2/KLF4、LMYC/LIN28(マーカーとしてpmaxGFPを使用)をNeonRTransfectionsystemを使用して遺伝子導入した。ES培地にて15日間培養し、mitomycinC処理したMEFs細胞とSTO細胞上に播種した。コロニーは26継代まで培養維持した。この期間において、ES細胞様形態を有しているかどうか、またアルカリフォスファターゼ活性があるかどうかを評価した。HDDPCs由来iPS細胞では、MEFs細胞上では樹立・維持が可能であったが、STO細胞上では維持ができなかった。本結果から、HDDPCsは初期化因子により初期することができ、STO細胞よりもMEFs細胞の方が、HDDPCs由来iPS細胞の樹立・維持には良いことが示唆され、feeder細胞の選択は、効果的なiPS細胞の樹立に重要な要素であることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of mouse STO feeder cell lines that confer resistance to several types of selective drugs (2012)
  • 著者名/発表者名: Issei Saitoh, Masahiro Sato, Yoko Iwase, Emi Inada, Toshiki Nomura, Eri Akasaka, Youichi Yamasaki, Hirofumi Noguchi
  • 雑誌名: Cell Medicine 巻: 3(1) ページ: 97-102
  • DOI: DOI:http://dx.doi.org/10.3727/215517912X639414
• [学会発表] Choice of feeders is important for the preparation of iPS cells from primarily cultured human deciduous tooth dental pulp cells (2013)
  • 著者名/発表者名: 村上智哉,齊藤一誠,稲田絵美,岩瀬陽子,長谷川大子,窪田直子,松本祐子,大島邦子,岡暁子,山崎要一,早崎治明
  • 学会等名: 第51回日本小児歯科学会大会
  • 発表場所: 岐阜市
  • 年月日: 20130523-24
• [備考] 新潟大学小児歯科学分野
  • URL: http://www.pediatric-dent.net/pedo.html