| 研究概要 |
目的 酸化ストレスを制御する転写因子の１つであるFoxo1に着目し、酸化ストレスと骨形成の分子メカニズムの解明を行ってきた。今回、酸化ストレスによる歯周病の病態の変化を明らかにするために、まず骨芽細胞が破骨細胞への分化に影響を及ぼすメカニズムに注目した。
方法 1,25(OH)2D3とBMP-2 (100 ng/mL)で刺激したマウスの初代骨芽細胞からmRNAを抽出し、real time RT-PCR法で破骨細胞分化誘導因子であるRANKL、破骨細胞分化抑制因子であるOPGおよび1,25(OH)2D3により発現が亢進するVDRのmRNA発現を定量的に解析した。さらにSmad1をノックダウンし、同様に両因子の共刺激によるVDR発現を確認した。VDRとSmad1の細胞内局在を免疫染色法により確認した。
結果 1,25(OH)2D3 (10-8 M)やBMP-2 (100 ng/mL)刺激により、RANKL mRNA発現は1,25(OH)2D3単独刺激に比べて有意に高値を示した。さらにVDRタンパク質発現は上昇していた。一方、Smad1をノックダウンした細胞では、コントロール群に比べて、VDR、RANKL発現は減少した。VDRとSmad1はの局在は両刺激により、核内に見られた。
結論 BMP-2がSmad1を介して、1,25(OH)2D3存在下でのVDR発現を上昇させることにより、1,25(OH)2D3の作用が増強し、その結果、RANKL mRNA発現が上昇する可能性が示唆された。
|
