2012 年度実績報告書

内因性生理活性物質の概日性レベル変動と生物現象

研究課題

研究課題/領域番号	23850003
研究機関	東北大学
研究代表者	石丸泰寛東北大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (80590207)
研究期間 (年度)	2011-08-24 – 2013-03-31
キーワード	生理活性 / 分子認識 / 植物 / 生体分子
研究概要	ジャスモン酸グリコシドは，アメリカネムノキの就眠運動を誘導する化合物である．それゆえ，植物体内におけるジャスモン酸グリコシド量とそのアグリコン量の変化が，この就眠運動を引き起こしていると考えられる．さらに，この就眠運動にカルシウムチャネルとカリウムチャネルが直接関わることから，これらの分子機構を明らかにする必用もある．本研究では，これらのグリコシド生合成・加水分解機構や，それに関わるチャネルを分子レベルで明らかにすることを試みた．昨年まで，アメリカネムノキの機械刺激応答カルシウムチャネルであるSsMCA1の全長とRNA量の内部標準遺伝子としてTubulinの断片配列の単離に成功している．引き続きMCAの相同性の高い遺伝子の全長の単離を試み，さらにSsMCA2の全長配列を明らかにした．これらの配列情報をもとに特異的なプライマーを作製し，定量的PCR法を行った．その結果，体積が収縮する細胞では，細胞の収縮と共に発現の減少し，体積が膨張する細胞では発現が増加していた．以上から，カルシウムチャネルの発現変化と就眠運動には関連性があると考えられる．カルシウムチャネルに加え，アメリカネムノキからカリウムチャネルの単離も行った．これまでカリウム吸収型チャネルSPICK1とSPICK2，放出型チャネルSPORK1の全長配列が報告されている．今回我々は，SPICK1とSPICK2に加え，SPICK3，SPICK4とSPORK2，SPORK3の全長の単離に成功した．これらの遺伝子発現解析を行い，SPICK2がアメリカネムノキの主要なカリウムチャネルであることや，収縮細胞ではSPORKの発現量が高く，膨張細胞ではSPICKの発現が高いことを明らかにした．
現在までの達成度 (区分)	理由 24年度が最終年度であるため、記入しない。
今後の研究の推進方策	24年度が最終年度であるため、記入しない。