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近年、大腸菌O157:H7などの病原細菌が環境水に混入し、生鮮野菜などを通してヒトに感染するという事例が相次いで報告されている。これらの感染症を未然に防ぐためには、環境水中における病原細菌を早期に検出し、汚染源を特定・除去する必要がある。そこで本研究では、蛍光標識したO157抗体とフローサイトメトリによるセルソーティング(FCM-FACS)を用いて、大腸菌O157を特異的に検出し、分離する手法を構築した。分離後の細胞は培地で増殖させたのちO157であることを確認した。純粋培養株を用いた実験の結果、大腸菌O157と大腸菌K12を任意の割合で混合したサンプルからも大腸菌O157だけを高効率に分離することができた。環境水サンプルに本手法を適用するにあたっては、濾過および細胞の回収方法、懸濁物質の除去手法などを検討し、最適化した。その結果、大腸菌O157を比較的低濃度(10cells/ml)接種した環境水サンプルからも病原体を特異的に検出・分離することができた。今後は非接種の環境水サンプルから病原体を検出・分離し、分離後の病原体を解析することによって、汚染源の特定につなげていきたい。
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