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変異細胞が正常上皮細胞に囲まれた場合、ある種の変異細胞は正常細胞層の頭頂側へ押し出されるが、その分子メカニズムは不明であった。私は平成２３年度までに、Src変異細胞に接している正常上皮細胞内で中間径フィラメントのvimentinとアクチン結合タンパク質のfilamin Aが変異細胞をはじき出す現象をポジティブに制御していることを発見した。この結果に基づいて２４年度は１）filamin Aとvimentinの相互作用の解析、２）生体モデルを用いたfilamin A集積の検証、３）filamin Aの上流のシグナルの探索、の３つの点について研究を進めた。１）について、filamin A もしくはvimentinのノックダウン細胞株と変異細胞を混合して、ノックダウン細胞内におけるfilamin A もしくはvimentinの挙動を観察した。その結果、filamin Aノックダウン細胞内でのvimentin集積は有意に抑制されたのに対し、その逆は影響を受けなかった。つまりfilaminはvimentin集積の上流で作用していることが示唆された。２）変異細胞の周りの正常細胞におけるfilamin集積が個体レベルでも観察されるのか検証するため、zebrafish胚を用いた。その結果、押し出される前のv-Src細胞の周りにfilamin Aが集積しており、さらにzebrafish胚からfilamin Aをノックダウンするとv-Src発現細胞が頭頂側へ押し出される現象が顕著に抑えられた。３）様々なシグナルの阻害剤やドミナントネガティブ変異体を用いた結果、隣接する変異細胞内のmyosin活性が正常細胞内のfilamin集積を誘導することが分かった。以上の結果は、周りの正常細胞が積極的に変異細胞を頭頂側へ押し出すことを分子レベルで示した世界で初めての報告であり、現在論文のリバイス中である。
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