| 研究概要 |
本研究は,変形性関節症の原因遺伝子のひとつと推測されているWISP-1遺伝子に着目し,変形性関節症及び軟骨分化への関わりを,組織学的・分子細胞生物学的に解明することを目的としている.そこで今年度はWISP-1遺伝子欠損マウス顎関節部の軟骨組織よりRNAを回収し，軟骨分化マーカーを中心に遺伝子発現量を定量性RT-PCR法にて確認した．その結果，WISP-1遺伝子欠損マウス群において野生型マウス群と比べ，Sox9，Aggrecan，TypeIIcollagenの遺伝子発現量は低下していた．次に，大腿骨軟骨組織より軟骨細胞を単離し，軟骨分化マーカーの一つであるSox9，Aggrecan，TypeIIcollagenの遺伝子発現量を定量性RT-PCR法にて検討した．その結果，WISP-1遺伝子欠損マウス群において，すべての遺伝子発現量は低下していた．また，膝関節部の軟骨組織を組織学的に検討した結果，WISP-1遺伝子欠損マウス群において，変形性関節症様の組織像を呈していた．
最後に，アデノウイルスベクターを用いてWISP-1遺伝子を強制発現させたヒト骨髄由来間葉系幹細胞 (hBMSCs)を軟骨分化誘導培地で培養し,培養４週後に組織を回収し,トルイジンブルー染色,サフラニンO染色を行い,組織学的に検討した.その結果,コントロール群と比べ軟骨分化が促進されることを明らかとなった．
以上の結果より,WISP-1遺伝子が軟骨分化に重要な役割を果たしていることが証明された.今後,そのメカニズムを詳細に検討していく予定である.
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