| 研究課題/領域番号 |
23K07749
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
王寺 幸輝 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (50343421)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| キーワード | 発毛再生 / 幹細胞 / 毛包 / 移植 / 毛乳頭 / 皮膚再生 / 再生医学 / Wntシグナル |
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| 研究実績の概要 |
本研究計画では、毛の発生を解析するために多能性幹細胞を樹立し、毛包誘導の可視化やプロセスを詳細に解析することで、発毛制御の基盤を確立することを目標とする。
計画初年度（令和5年度）は、発毛イベントを解析可能な遺伝子発現系を樹立するため、上皮分化マーカーとしてKeratinプロモーターと赤色蛍光タンパク質（DsRed）をクローニングしたplasmid（pKD）を構築した。次に、Versican-Tgマウス（versicanプロモーター下でEGFPを発現するマウス）由来毛乳頭細胞（V-DPC）にpKDを遺伝子導入後、発毛イベントの可視化を実現可能とするVK-DPCの樹立に成功した。現在、VK-DPCのクローン株を解析し、初期化に適した細胞株の選定を行っている。
また、初期化細胞を用いた毛包誘導の基礎的検討として、マウスiPS細胞株を用いた誘導条件の検討を行った。既報の方法（Leeら、Cell Rep., 2018）を参考に、iPS細胞から毛包様組織の誘導を実施し、組織レベルでの詳細な解析を行っている。今後は、上記樹立細胞株の初期化により多能性幹細胞株を樹立し、それを用いた毛包細胞・組織への分化誘導とプロセスの可視化を進めることで、毛の発生・制御のメカニズムの解明を行ってゆく予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
研究計画に基づき、期待した実験成果が得られており、学会発表等での成果報告を行っているため。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度（令和6年度）では、VK-DPCの初期化を実施することで、発毛解析ツールの構築と毛包誘導における可視化解析を行う予定である。
具体的には、これまでに得られている成績をもとに、上記細胞株を用いて蛍光観察により分化細胞を連続的に追跡し、発毛のリアルタイム解析により分化プロセスや細胞状態を解析する。さらに、誘導後の毛包組織を組織学的に解析することでネイティブな毛包との比較を行う。また、正常発生した毛包組織との遺伝子発現をNGS解析により網羅的に比較し、発毛における細胞内現象を詳細に解析することで、発毛制御データの構築を目指す予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
（理由）本研究計画の2年目（令和6年度）以降において、NGS解析を含む網羅的な遺伝子発現解析を計画している。受託研究費等の発生が予想されたため、備品、消耗品や試薬等を必要最小限の量で計画的に購入し、繰越金を捻出することで、来年度に備えた。
（使用計画）本年度以降では、繰越金を合算することによりNGS解析による網羅的な遺伝子発現解析を行う予定で、既に購入した消耗品を継続使用することや、必要物品を計画的に購入することで、研究を遂行する。
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