| 研究課題/領域番号 |
23K07823
|
|---|
| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
|---|
研究代表者 |
奥山 一生 国立研究開発法人理化学研究所, 生命医科学研究センター, 研究員 (60712750)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
|
| キーワード | Runx転写因子 / 分子間相互作用解析 / BioID法 |
|---|
| 研究実績の概要 |
Runx転写因子はαサブユニットとCbfbで構成されるヘテロ二量体である。哺乳類ではRunx1、2、3のαサブユニットが存在するが、その機能的差異は不明である。血液細胞分化に重要なRunx1およびRunx3の機能解析を行うために、BioID法を用いた分子間相互作用解析を行うことを計画した。そのために当初Runx3-AirIDノックインマウスを作製する予定であったが、所属研究室においてRosa26領域よりscFv-AirIDを発現するマウス系統を樹立し、その有効性が確認できたことから、GCN4付加Runx1、Runx3を発現するマウスを作製することを計画した。GCN4はscFvの特異的な抗原であり、GCN4を標的タンパク質に付加することで、GCN4/scFv反応を介してAirIDを標的タンパク質に動員することができる。当該年度では、Runx1-GCN4マウス系統を樹立し、すでに樹立していたRunx1-AirIDマウスと共に表現型解析を行った。その結果いずれのマウスも生存・生殖が可能であり、ヘテロ個体では胸腺内T細胞分化についても概ね正常であることが分かった。Runx3-GCN4マウスを作製するために、ガイドRNA、ドナーDNAの設計を行い、受精卵でのゲノム編集を実施したが、ノックイン個体が得られなかった。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
Runx3-GCN4マウスの作製において、ゲノム編集によるノックイン個体が得られなかったため。
|
| 今後の研究の推進方策 |
Runx3-GCN4マウス系統を樹立するために、再度受精卵を用いてのゲノム編集を行う。
|
