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ヒトMRE11/RAS50/NBS1（MRN）は放射線や抗がん剤により引き起こされるDNA二本鎖切断の修復に必須の役割を担うヌクレアーゼ複合体である。DNA二本鎖切断が相同組換えにより修復される際、MRNの働きがどのように制御されているか、またMRNと共に働くとされる複数のヌクレアーゼやDNA結合タンパク質がどのように協調的に働いているかは未だ不明な点が多い。本研究ではMRNの働きを起点に相同組換え開始に働くタンパク質群の働きを、主として生化学・生物物理学的手法を用いて明らかにすることを目的とする。本年度は過去の研究計画で実施したMRNの動的構造解析で得られた観察結果を元に、MRNの特異な蛋白質構造の動的変化について調べ、RAD50のフックモチーフにMRN全体の蛋白質構造を保つ中心的な役割があることを明らかにした。またこの結果をさらにサポートするため、フックモチーフを他の蛋白質の二量体形成ドメインと交換したキメラRad50を持つ分裂酵母を用いた遺伝学的解析を行い、Rad50フックモチーフの機能が二量体形成であることを示す結果を得た。また相同組換え開始反応で働く種々のヒト蛋白質群の精製も行った。特に相同組換え反応で重要なRAD51、減数分裂期組換えでRad51と共に働くとされるDMC1、およびこれらのメディエーター蛋白質であるBRCA2についてはDNA結合能などの基礎的な生化学的解析を実施した。
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