| 研究課題/領域番号 |
21H02380
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
浜崎 伸彦 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 客員准教授 (10757008)
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| 研究分担者 |
竹尾 透 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 教授 (10517014)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 減数分裂 / 転写因子 / ES細胞 |
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| 研究実績の概要 |
今年度は減数分裂が誘導されると蛍光を発するようになるレポーターES細胞の樹立に取り組んだ。マウスES細胞におけるノックインする際の方法を検討し、最も効率の高い手法を確立したので、今後はこちらの手法を基盤として、よりスムーズなノックイン作製を行うことができるようになった。今後は樹立されるレポーターES細胞を用いて、減数分裂を起こしうる転写因子の組み合わせを同定する。候補転写因子のライブラリ作製も完了し、あとは候補因子の絞り込みを行えるようになっている。これが成功した場合には、減数分裂型染色体構造を有しているかを免疫染色法により確認する。また直接誘導卵母細胞にも減数分裂を付与することができるかを検討を行い、それぞれの遺伝子発現パターンをRNA-seqにて検討する。これにより、減数分裂誘導モジュールが引き起こす転写への影響を明らかにすることができる。より具体的には、ES細胞特異的/卵母細胞特異的な応答遺伝子を同定し、その違いを引き起こすエピゲノムの特性を網羅的に検討する。これにより減数分裂が生殖細胞と非生殖細胞でどのように制御されているのかという問いに答えていく。この際、ES細胞のパブリックなエピゲノム情報は豊富に存在するが、卵母細胞の包括的なエピゲノム情報が存在していないので、貴重な雌性生殖細胞のリソースとして共有し、活用されることが見込まれる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マウスES細胞におけるノックインする際の方法を検討し、最も効率の高い手法を確立したので、今後はこちらの手法を基盤として、よりスムーズなノックイン作製を行うことができるようになった。また候補転写因子のライブラリ作製も完了し、あとは候補因子の絞り込みを行うことを行えるようになっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度は減数分裂が誘導されると蛍光を発するようになるレポーターES細胞の樹立に取り組んだ。今後は樹立されるレポーターES細胞を用いて、減数分裂を起こしうる転写因子の組み合わせを同定する。これが成功した場合には、減数分裂型染色体構造を有しているかを免疫染色法により確認する。また直接誘導卵母細胞にも減数分裂を付与することができるかを検討を行い、それぞれの遺伝子発現パターンをRNA-seqにて検討する。これにより、減数分裂誘導モジュールが引き起こす転写への影響を明らかにすることができる。より具体的には、ES細胞特異的/卵母細胞特異的な応答遺伝子を同定し、その違いを引き起こすエピゲノムの特性を網羅的に検討する。これにより減数分裂が生殖細胞と非生殖細胞でどのように制御されているのかという問いに答えていく。この際、ES細胞のパブリックなエピゲノム情報は豊富に存在するが、卵母細胞の包括的なエピゲノム情報が存在していないので、貴重な雌性生殖細胞のリソースとして共有し、活用されることが見込まれる。
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