| 研究課題/領域番号 |
22H02834
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
市村 幸一 順天堂大学, 医学部, 特任教授 (40231146)
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| 研究分担者 |
鈴木 穣 東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 教授 (40323646)
岡田 随象 大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (70727411)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 中枢神経系胚細胞腫 / 脳腫瘍 / ロングリード / 全ゲノム解析 / ゲノムワイド関連解析 |
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| 研究実績の概要 |
順天堂大学で保管している胚細胞腫コンソーシアムまたはJCCG中央診断の余剰検体から、非ジャーミノーマ胚細胞腫を中心に中枢神経系胚細胞腫 27例の凍結手術検体とマッチした血液DNAに対し、PromethIONを用いたロングリードシークエンスを研究分担者である東京大学大学院新領域創成科学研究科鈴木穣教授の研究室で行った。一部は先進ゲノム支援の支援のもとに行われた。腫瘍と血液DNA合わせて54検体については、DIN値の平均は7.9と比較的DNAのインテグリティは保たれていた。解析が完了した16検体については、全リード塩基数は平均106Gb、N50は平均9.7kbだった。Read depthは平均36だった。これらについては先行研究においてショートリードの全ゲノム解析とRNAシークエンスが行われており、ロングリード解析データとの比較を進めている。また、日本人健常対象集団と比較して有意な頻度差を示す多型を検索し、中枢神経系胚細胞腫の遺伝要因を同定する目的で、アジア人に多い塩基多型を集めたマイクロアレイ（Infinium Asian Screening Array）を用いてゲノムワイド関連解析を行うため、胚細胞腫コンソーシアムまたはJCCG中央診断の余剰検体として保管されている400例あまりの中枢神経系胚細胞腫からDNAの抽出・定量を行った。さらに、順天堂大学で摘出されたCNSGCT（奇形腫）の新鮮手術検体1例に対して初代培養を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
腫瘍にマッチした血液DNAが存在し、ロングリード解析に十分量なDNAが得られた検体は27例であり、当初の目標を十分達成できたと考える。これらについては全例ロングリード解析が行われており、研究課題は順調に進捗していると考えられる。ゲノムワイド関連解析については、当研究室で管理する400例あまりの中枢神経系胚細胞腫凍結検体からDNAの抽出を進めており、こちらも順調に進捗している。初代培養については令和4年度は1例の検体が得られ、細胞は順調に増殖を続けている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は27例の中枢神経系胚細胞腫のロングリード解析を進め、染色体間または染色体内の転座・広範な欠失や挿入・クロモスリプシスなどの構造解析や全ゲノム的なメチル化解析を進めるとともに、先行研究で得られたショートリードによる全ゲノム解析のデータと比較しながら、全ゲノムで蛋白翻訳領域・プロモーター・エンハンサー・ノンコーディングRNAなどの点突然変異を調べる予定である。ゲノムワイド関連解析については、令和5年度中にDNA抽出を完了し、マイクロアレイ解析を行う予定である。
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