メモリー様分化誘導を基盤とした多種類のがんに有効なCAR-NK細胞製剤の新規開発

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22H03036
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 今井 千速 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (90419284)
• 研究分担者: 三原 圭一朗 藤田医科大学, 国際再生医療センター, 教授 (90363077) ; 今村 勝 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (80464006) ; 久保 貴紀 安田女子大学, 薬学部, 准教授 (90435751)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: NK細胞 / キメラ抗原受容体 / CAR-NK細胞 / メモリー様NK細胞 / CAR-T細胞 / NKp44 / 肉腫 / 小児がん

研究実績の概要

第3者健常成人由来CAR-NK細胞製剤の新規開発を最終目標に、本研究ではメモリー様NK細胞の製造法の新規技術ならびに新規CAR遺伝子の開発を目指して、（１）NK細胞のメモリー様分化の分子基盤と誘導法の解明、製造法および遺伝子改変法の確立、（２）膜型サイトカインの新規開発、（３）NK細胞における最適なシグナルドメインの同定、（４）開発したNK細胞製剤の有用性の証明（in-vitro / ヒト腫瘍の異種移植マウスモデル）、の4項目に沿って研究を進めている。（１）については従来型のフィーダー細胞を用いる培養と複数サイトカインと刺激抗体による培養との比較検討を、複数のドナーについて実施中である。開始年度には、世界情勢の影響によりNK細胞用特殊培地がまったく入手できなくなる事態が生じたが、その間は、本邦で入手できる別培地の評価を行った。（２）膜型サイトカインについてはＸ遺伝子の膜結合型コンストラクトをデザイン、ベクターを作成、ウイルスベクターにより細胞株やヒトNK細胞に遺伝子導入し、同コンストラクトが膜結合の状態で膜表面にサイトカインＸを発現できることを確認した。機能について検討中である。（３）CD3zに加えて4-1BBまたはCD28などの共刺激受容体シグナルドメインを追加することで、CAR-NK細胞の傷害活性の亢進が確認されている。これら以外の共刺激分子の評価のため、NKp44-CARをベースに５つの異なるコンストラクトを作成した。まずはCAR-T細胞における評価中である。ヒト腫瘍検体RNAにおけるNKp44リガンド発現を検討し、発現が確認された。（４）異種腫瘍を生着させたマウスモデルの作成を複数の腫瘍系について行った。ルシフェラーぜによる腫瘍細胞増殖のモニタリングが可能であることを確認した。NK細胞/CAR-NK細胞のIn vivo機能評価を準備した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

４つの検討課題にすべて着手済みであり、かつ、一定の進捗と実験結果が得られているため。

今後の研究の推進方策

先の計画通りに進める予定である。膜結合型サイトカインについては別コンストラクトの開発を検討している。

研究成果

• [雑誌論文] Outcomes following induction failure in Japanese children with acute lymphoblastic leukemia (2023)
  • 著者名/発表者名: Imai Chihaya、Sato Atsushi、Hiwatari Mitsuteru、Shimomura Yasuto、Hori Toshinori、Suenobu Souichi、Imamura Toshihiko、Hara Junichi、Hasegawa Daisuke、Takahashi Hiroyuki、Moriya Kunihiko、Katayama Saori、Tomizawa Daisuke、Moritake Hiroshi、Taga Takashi、Horibe Keizo、Koh Katsuyoshi、Manabe Atsushi、Okamoto Yasuhiro
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 118 ページ: 99～106
  • DOI: 10.1007/s12185-023-03600-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Newly diagnosed ETV6-RUNX1?positive B-acute lymphoblastic leukemia localized to the left pelvic bone marrow (2022)
  • 著者名/発表者名: Baba Minori、Imamura Masaru、Imai Chihaya
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 115 ページ: 151～152
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03269-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Discontinuation of tyrosine kinase inhibitors in pediatric chronic myeloid leukemia (2022)
  • 著者名/発表者名: Shima Haruko、Kada Akiko、Tanizawa Akihiko、Sato Iori、Tono Chikako、Ito Masaki、Yuza Yuki、Watanabe Akihiro、Kamibeppu Kiyoko、Uryu Hideko、Koh Katsuyoshi、Imai Chihaya、Yoshida Nao、Koga Yuhki、Fujita Naoto、Saito Akiko M.、Adachi Souichi、Ishii Eiichi、Shimada Hiroyuki
  • 雑誌名: Pediatric Blood & Cancer 巻: 69 ページ: e29699
  • DOI: 10.1002/pbc.29699
  • 査読あり
• [雑誌論文] <i>BRAF</i> V600E-positive cells as molecular markers of bone marrow disease in pediatric Langerhans cell histiocytosis (2022)
  • 著者名/発表者名: Ko Kudo, Toki T, Kanezaki R, Tanaka T, Kamio T, Sato T, Sasaki S, Imamura M, Imai C, et al.
  • 雑誌名: Haematologica 巻: 107 ページ: 1719～1725
  • DOI: 10.3324/haematol.2021.279857
  • 査読あり
• [雑誌論文] Short stature as an initial presenting presentation of unicentric Castleman disease in a child: A case report with long-term follow-up and a literature review (2022)
  • 著者名/発表者名: Sonoda Kaori、Kaneko Utako、Hiura Makoto、Kinoshita Yoshiaki、Umezu Hajime、Ito Shuichi、Saitoh Akihiko、Imai Chihaya
  • 雑誌名: Modern Rheumatology Case Reports 巻: 7 ページ: 261～266
  • DOI: 10.1093/mrcr/rxac034
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Time Course of Conical Teeth in Anhidrotic Ectodermal Dysplasia with Immunodeficiency (2022)
  • 著者名/発表者名: Aizawa Yuta、Imai Chihaya、Saitoh Akihiko
  • 雑誌名: Journal of Clinical Immunology 巻: 42 ページ: 1168～1170
  • DOI: 10.1007/s10875-022-01300-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disease Progression of WHIM Syndrome in an International Cohort of 66 Pediatric and Adult Patients (2022)
  • 著者名/発表者名: Geier CB, Ellison M, Cruz R,,,, Imai C, et al.
  • 雑誌名: Journal of Clinical Immunology 巻: 42 ページ: 1748～1765
  • DOI: 10.1007/s10875-022-01312-7
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] NKp44-based chimeric antigen receptor effectively redirects primary T cells against synovial sarcoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Murayama Yudai、Kasahara Yasushi、Kubo Nobuhiro、Shin Chansu、Imamura Masaru、Oike Naoki、Ariizumi Takashi、Saitoh Akihiko、Baba Minori、Miyazaki Tomohiro、Suzuki Yuko、Ling Yiwei、Okuda Shujiro、Mihara Keichiro、Ogose Akira、Kawashima Hiroyuki、Imai Chihaya
  • 雑誌名: Translational Oncology 巻: 25 ページ: 101521～101521
  • DOI: 10.1016/j.tranon.2022.101521
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Epigenetic upregulation of Schlafen11 renders WNT- and SHH-activated medulloblastomas sensitive to cisplatin (2022)
  • 著者名/発表者名: Nakata S, Murai J, Okada M, Findlay TH, Takahashi H, Miyahara H, Tateishi K, Yamada S, Saito T, On J, Watanabe J, Tsukamoto Y, Yoshimura J, Oishi M, Nakano T, Imamura M, Imai C, et al
  • 雑誌名: Neuro-Oncology 巻: noac243 ページ: noac243
  • DOI: 10.1093/neuonc/noac243
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Acute fulminant intravascular hemolysis induced by Clostridium perfringens in a symptomatic multiple myeloma patient under immuno-chemotherapy (2022)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Hideyuki、Mizutani Yuki、Iriyama Chisako、Goto Naoe、Okamoto Akinao、Kato Toshiharu、Shintani Chiyo、Yamamoto Naoki、Miyama Takahiko、Mihara Keichiro、Okamoto Masataka、Tomita Akihiro
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 2813～2815
  • DOI: 10.1007/s00277-022-05010-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD19-positive lymphocyte count is critical for acquisition of anti-SARS-CoV-2 IgG after vaccination in B-cell lymphoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Okamoto A, Fujigaki H, Iriyama C, Goto N, Yamamoto H, Mihara K, Inaguma Y, Miura Y, Furukawa K, Yamamoto Y, Akatsuka Y, Kasahara S, Miyao K, Tokuda M, Sato S, Mizutani Y, Osawa M, Hattori K, Iba S, Kajiya R, Okamoto M, Saito K, Tomita A.
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 6 ページ: 3230～3233
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021006302
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Elevated METTL9 is associated with peritoneal dissemination in human scirrhous gastric cancers (2022)
  • 著者名/発表者名: Hara Toshifumi、Tominaga Yuuki、Ueda Koji、Mihara Keichiro、Yanagihara Kazuyoshi、Takei Yoshifumi
  • 雑誌名: Biochemistry and Biophysics Reports 巻: 30 ページ: 101255～101255
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2022.101255
• [雑誌論文] 未治療移植非適応骨髄腫に対するdaratumumab 併用レジメンと微小残存病変 (2022)
  • 著者名/発表者名: 美山貴彦、三原圭一朗
  • 雑誌名: 血液内科 巻: 84(6) ページ: 1-8
• [雑誌論文] 骨髄腫に対する治療薬・治療法の特徴 モノクローナル抗体． (2022)
  • 著者名/発表者名: 美山貴彦、三原圭一朗
  • 雑誌名: 内科 巻: 130(4) ページ: 749-754
• [雑誌論文] Heat shock‐induced heme oxygenase‐1 expression in a mouse hepatoma cell line is dependent on <scp>HSF1</scp> and modified by <scp>NRF2</scp> and <scp>BACH1</scp> (2022)
  • 著者名/発表者名: Inouye Sachiye、Kubo Takanori、Miyamoto Takafumi、Iyoda Takuya、Okita Naoyuki、Akagi Reiko
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 27 ページ: 719～730
  • DOI: 10.1111/gtc.12986
  • 査読あり
• [雑誌論文] Palladium-catalyzed/copper-mediated carbon?carbon cross-coupling reaction for synthesis of 6-unsubstituted 2-aryldihydropyrimidines (2022)
  • 著者名/発表者名: Nishimura Yoshio、Kubo Takanori、Takayama Saho、Yoshida Hanako、Cho Hidetsura
  • 雑誌名: RSC Advances 巻: 12 ページ: 28113～28122
  • DOI: 10.1039/d2ra05155a
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Comparative Study of Patient-Derived Tumor Models of Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Involving Orthotopic Implantation (2022)
  • 著者名/発表者名: Yanagihara Kazuyoshi、Iino Yuki、Yokozaki Hiroshi、Kubo Takanori、Oda Tatsuya、Kubo Takashi、Komatsu Masayuki、Sasaki Hiroki、Ichikawa Hitoshi、Kuwata Takeshi、Seyama Toshio、Ochiai Atsushi
  • 雑誌名: Pathobiology 巻: 89 ページ: 222～232
  • DOI: 10.1159/000521714
  • 査読あり
• [雑誌論文] コンジュゲート核酸の合成法、デザインと応用. (2022)
  • 著者名/発表者名: 久保貴紀、瀬山敏雄
  • 雑誌名: Pharm Stage 巻: 22(2) ページ: 71-77
• [学会発表] 遺伝子改変T細胞／NK細胞によるがん治療の現状と未来． (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速
  • 学会等名: 第762回新潟医学会例会シンポジウム「がん免疫療法の現状と未来」新潟市中央区（ウェブカンファレンス）
  • 招待講演
• [学会発表] 小児がんに対するがん免疫療法． (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速．
  • 学会等名: 第16回京都地区小児血液腫瘍研究会．京都市
  • 招待講演
• [学会発表] CAR-T細胞療法の歴史と展望． (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速．
  • 学会等名: CAR-T seminar in Niigata．基調講演 新潟市中央区
  • 招待講演
• [学会発表] 小児がん・がん免疫療法． (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速．
  • 学会等名: 新潟日報社がん対策事業 ~あなたががんになる前に、なった後に、できること~ 連続講演「がん医療の今」 新潟市中央区
  • 招待講演
• [学会発表] INDUCTION FAILURE IN CHILDREN WITH ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA IN JAPAN: CCLSG/KYCCSG/JACLS/TCCSG JOINT STUDY. (2022)
  • 著者名/発表者名: Chihaya Imai, et al.
  • 学会等名: The 54th Annual Congress of the International Society of Paediatric Oncology (SIOP 2022). Barcelona, Spain
  • 国際学会
• [学会発表] ALLにおけるCAR-T療法：Basic and Beyond (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速
  • 学会等名: Novartis CAR-T Web Seminar．東京都
  • 招待講演
• [学会発表] SJMB-96 based high-dose chemotherapy and CSI within 2 weeks after surgery for medulloblastoma; A Case Series from a Single-Center (2022)
  • 著者名/発表者名: Imamura Masaru, Baba Minori, Kubo Nobuhiro, Shin Changsu, Kasahara Yasushi, Hosokai Ryosuke, Iwabuchi Haruko, Oishi Makoto, Ishikawa Hiroyuki, Imai Chihaya
  • 学会等名: 第64回日本小児血液・がん学会学術集会
• [学会発表] Effects of KIR Gene profiles and NKG2D genotype on NK Cell Functions in Healthy individuals (2022)
  • 著者名/発表者名: Ryosuke Hosokai, Chihaya Imai
  • 学会等名: 第84回日本血液学会
• [学会発表] Generation of chimeric antigen receptor-transduced natural killer cells by using a feeder cell-free system (2022)
  • 著者名/発表者名: Nobuhiro Kubo, Minori Baba, Chansu Shin, Ryosuke Hosokai, Haruko Iwabuchi, Masaru Imamura, Akihiko Saitoh, Chihaya Imai
  • 学会等名: 第84回日本血液学会
• [学会発表] 免疫チェックポイント阻害剤としての脂肪酸結合型siRNA (2022)
  • 著者名/発表者名: 久保貴紀，西村良夫、栁原五吉、三原圭一郎、瀬山敏雄
  • 学会等名: 日本核酸医薬学会 第7回年会
• [学会発表] Programmed cell death ligand-1(PD-L1)を標的としたLipid-siRNAコンジュゲートのRNAi効果について (2022)
  • 著者名/発表者名: 久保貴紀、湛増里奈、西村良夫、柳原五吉、瀬山敏雄
  • 学会等名: 第61回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中四国支部学術大会
• [学会発表] 膵臓がん肝転移マウスモデルに対するLipid-siRNAの抗腫瘍効果 (2022)
  • 著者名/発表者名: 久保貴紀、湛増里奈、西村良夫、三原圭一朗、柳原五吉、瀬山敏雄
  • 学会等名: 日本薬学会 第143年会
• [図書] 新規モダリティ医薬品のための新しいＤＤＳ技術と製剤化 (2023)
  • 著者名/発表者名: 執筆者：110名、技術情報協会
  • 総ページ数: 580
  • 出版者: 技術情報協会
  • ISBN: 978-4-86104-936-1
• [図書] 小児血液・腫瘍学 改訂第2版 「CAR-T療法」 (2022)
  • 著者名/発表者名: 今井千速 分担執筆（日本小児血液・がん学会編）
  • 総ページ数: 640
  • 出版者: 診断と治療社
  • ISBN: 9784787824899