虚血組織に血管新生を誘導する経静脈投与が可能なエクソソーム血管再生療法の開発

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22H03158
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 濱野 公一 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60263787)
• 研究分担者: 鈴木 亮 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (10570319) ; 上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070) ; 藏澄 宏之 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (50645116)
• 研究期間 (年度): 2022-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: 再生医療 / エクソソーム / 血管新生

研究実績の概要

本年度は、エクソソームを分泌する細胞として歯髄幹細胞を選択し、歯髄幹細胞が分泌するエクソソームについて解析を行った。
歯髄幹細胞は、メーカーから購入したが、そのメーカーが歯髄幹細胞用培地として販売している培地には血清が含まれている。そのような血清には、動物由来のエクソソームが含まれていることから、xeno-free培地で歯髄幹細胞を培養できる培地の検討を行った。
本年度は、国内メーカー2社から販売されている間葉系幹細胞用の2種類のxeno-free培地を選択した。
歯髄幹細胞を3日間培養し、その培養上清中の成長因子、および、その培養上清中に含まれるエクソソームに内包されている成長因子の量をELISA解析で比較した。6種類の成長因子を解析したところ、5種類の成長因子は培養上清で高い値を示したが、1種類の成長因子は、培養上清中に含まれるエクソソームに内包されている成長因子で高い値を示した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

歯髄幹細胞をxeno-free培地で培養できることを確認し、歯髄幹細胞が分泌するエクソソームに内包されている成長因子を解析することが出来たため。

今後の研究の推進方策

歯髄幹細胞をxeno-free培地で培養するときに分泌されるエクソソームの血管新生能を解析する。

研究成果

• [雑誌論文] Perivascular Adipose Tissue Is a Major Source of Nitric Oxide in Saphenous Vein Grafts Harvested via the No‐Touch Technique (2022)
  • 著者名/発表者名: Saito Toshiro、Kurazumi Hiroshi、Suzuki Ryo、Matsunaga Kazumasa、Tsubone Sarii、Lv Bochao、Kobayashi Sei、Nagase Takashi、Mizoguchi Takahiro、Samura Makoto、Suehiro Kotaro、Harada Takasuke、Morikage Noriyasu、Mikamo Akihito、Hamano Kimikazu
  • 雑誌名: Journal of the American Heart Association 巻: 11 ページ: e020637
  • DOI: 10.1161/JAHA.120.020637
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dry preserved multilayered fibroblast cell sheets are a new manageable tool for regenerative medicine to promote wound healing (2022)
  • 著者名/発表者名: Matsuno Yutaro、Yanagihara Masashi、Ueno Koji、Saito Toshiro、Kurazumi Hiroshi、Suzuki Ryo、Katsura Shunsaku、Oga Atsunori、Hamano Kimikazu
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 12 ページ: 12519
  • DOI: 10.1038/s41598-022-16345-6
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cryopreserved allogenic fibroblast sheets:development of a promising treatment for refractory skin ulcers (2022)
  • 著者名/発表者名: Soichi Ike, Koji Ueno, Masashi Yanagihara, Takahiro Mizoguchi, Takasuke Harada, Kotaro Suehiro, Hiroshi Kurazumi, Ryo Suzuki, Tomoko Kondo, Tomoaki Murata, Bungo Shirasawa, Noriyasu Morikage, Kimikazu Hamano
  • 雑誌名: American Journal of Translational Research 巻: 14 ページ: 3879-3892
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 3Dフリーザーによる細胞シート凍結の可能性 (2022)
  • 著者名/発表者名: 鈴木亮、上野耕司、池創一、山本直宗、松野祐太朗、藏澄宏之、桂春作、白澤文吾、濱野公一
  • 学会等名: 第21回日本再生医療学会
• [学会発表] ラットの食道縫合モデルに対する積層線維芽細胞シートの有効性 (2022)
  • 著者名/発表者名: 山本直宗、上野耕司、柳原正志、齊藤寿郎、松野祐太朗、池創一、濱野公一
  • 学会等名: 第21回日本再生医療学会