研究課題
精製したヒトFANCD2複合体に、FANCIなどの既知の会合蛋白以外にCtIPの存在を確認した（首都大学東京、礒辺教授らとの共同研究）。CtIPとFANCD2の会合は、精製した蛋白同意でも認められ、免疫沈降法、酵母2ハイブリッド法、ほ乳類細胞における２ハイブリッド法、PLA法などでも確認された。昨年までの検討で、CtIPのFANCD2によるリクルートメントが、クロスリンク修復時DNA切断後の末端処理に重要であることが判明した。また、CtIPはユビキチンと結合可能であることも確認した。さらに、今年度、CtIP 分子内のユビキチン結合ドメインがＮ末に存在することを見出した。Ｎ末部分に依存的にCtIP はダイマーを形成することが知られており、酵母GCN4のcoiled coilドメインで従来CtIP Ｎ末とスワップするとダイマー化に機能することが報告されている。そこで、CtIPＮ末ドメインをGCN4と置き換えてみたが、ユビキチンとの会合は低下したままであった。したがって、やはりCtIPのユビキチン結合ドメインはＮ末に存在すると思われた。放射線照射で細胞に直接ＤＮＡ二重鎖切断を与えても、FANCD2の存在がCtIPフォーカス形成に必要であることも確認した。したがって、FANCD2のDSB修復における役割、すなわち、相同組換えを促進する機能は、少なくとも部分的にCtIPを介するものであることがわかった。
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 4件) 備考 (1件)
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