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2014 年度 実績報告書

変異能力を有した培養B細胞株の機能拡張と抗体工学的活用

研究課題

研究課題/領域番号 24360343
研究機関岡山大学

研究代表者

金山 直樹  岡山大学, 自然科学研究科, 准教授 (70304334)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワード細胞工学 / DT40 / AID
研究実績の概要

本研究では、他の抗体作製技術で取得された任意のモノクローナル抗体の可変部や一本鎖抗体を、ヒトIgG1抗体定常部とのキメラ抗体としてニワトリB細胞株DT40の細胞表面に発現させることができ、かつ、DT40の変異能力によって親和性成熟できる革新的な動物細胞ディスプレーシステムを構築する。さらに、構造的に安定な変異抗体を発現する細胞の濃縮方法や、効率的な高親和性抗体産生細胞の選択方法を確立して、有用な活性を有した抗体創出の効率化を図る。
昨年度、ヒトモノクローナル抗体由来可変部遺伝子をDT40に導入して完全にヒト型の抗体を発現するDT40細胞の作製し、標的抗原に対する親和性の向上したクローンの単離に成功した。本年度は、ラマのモノクローナル抗体の可変部(VHH)をヒトIgG1 Fcとの融合タンパク質として発現させたDT40細胞を作製し、標的抗原に対する親和性の向上したクローンの単離に成功した。本研究によって、ヒトモノクローナル抗体、非抗体Fc融合タンパク質、一本鎖抗体Fc融合タンパクをDT40細胞にディスプレーし、改変する系を確立した。この系は、さまざまな実用的抗体なタンパク質の開発に有用であると考えられる。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] CSF-1 receptor-mediated differentiation of a new type of monocytic cell with B cell-stimulating activity: its selective dependence on IL-342014

    • 著者名/発表者名
      Fumihiro Yamane, Yumiko Nishikawa, Kazue Matsui, Miki Asakura, Eriko Iwasaki, Koji Watanabe, Hikaru Tanimoto, Hiroki Sano, Yuki Fujiwara, E. Richard Stanley, Naoki Kanayama, Neil A. Mabbott, Masaki Magari, Hitoshi Ohmori
    • 雑誌名

      Journal of Leukocyte Biology

      巻: 95 ページ: 19-31

    • DOI

      10.1189/jlb.0613311

    • 査読あり
  • [学会発表] 抗原レセプターシグナル依存性アポトーシス因子を抑制したニワトリB細胞株を用いた高親和性抗体の作製2014

    • 著者名/発表者名
      古賀 舞, 池田 美香, 小嶋 宏侑, 曲 正樹, 徳光 浩, 大森 斉, 金山 直樹
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2014-11-25
  • [学会発表] 変異能力を備えた B 細胞株を用いた抗体の機能改変2014

    • 著者名/発表者名
      金山 直樹 , 渡邊 康二 , 古賀 舞 , 川上 夏奈江 , 植月 英智 , 徳光 浩 , 曲 正樹 , 大森 斉
    • 学会等名
      第66回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2014-09-11

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公開日: 2016-06-01  

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