新しいＩＬ－６／ＩＬ－１２関連サイトカインによる免疫応答の制御機構の包括的解析

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24370058
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 善本 隆之 東京医科大学, 医学部, 教授 (80202406)
• 研究分担者: 中江 進 東京大学, 医科学研究所, 准教授 (60450409)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: IL-27 / EBI3 / IL-23 / p19

研究実績の概要

(1) EBI3/p19の疾患モデルマウスへの影響：昨年までに、卵白アルブミン（OVA）を完全フロインドアジュバントと共に免疫後、EBI3/p19発現ベクターをHydrodynamic injection法により静注し、1週間後所属リンパ節細胞をin vivoでOVAで再刺激し産生されるサイトカインをELISAで測定しTh分化への効果を調べると、EBI3/p19はIL-17産生を増強する活性を有していることがわかった。そこで、EBI3/p19を肝臓特異的なヒトアミロイドP蛋白特異的なプロモーターの下流に繋いだコンストラクトを作製し、EBI3/p19の発現量の異なる2系統のトランスジェニックマウス（Tg）を樹立した。このマウスを用いて、コンカナバリンA（Con A）で誘導する自己免疫性肝炎モデルに対する感受性を比較検討すると、EBI3/p19-Tgでは、IL-22産生の増加傾向と共に肝炎が軽減されことが明らかになった。

(2) EBI3/p19の組換え精製蛋白の作製：EBI3/p19-Tgでは、Con A投与によりIL-22産生が増加傾向にあったため、その作用機序を調べるためにEBI3/p19の組換え精製蛋白の作製を試みた。リンカーを挟んで1本鎖に繋いだEBI3/p19のcDNAを、CAGプロモーターの下流に入れた発現ベクターを構築し、HEK293T細胞に一過性にトランスフェクションし、細胞上清と細胞可溶蛋白を用いてウエスタンブロットを行ったところ、細胞内では発現が強かったが、上清中にはあまり産生されていなかった。現在も組換え精製蛋白の作製を検討中である。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Intratumoral CD4+ T lymphodepletion sensitizes poorly immunogenic melanomas to immunotherapy with an OX40 agonist. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara, S., Nagai, H., Shimoura, N., Oniki, S., Yoshimoto, T., and Nishigori, C.
  • 雑誌名: J. Invest. Dermatol. 巻: 134 ページ: 1884-1892
  • DOI: 10.1038/jid.2014.42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Contribution of IL-12/IL-35 common subunit p35 to maintaining the testicular immune privilege. (2014)
  • 著者名/発表者名: Terayama, H., Yoshimoto, T., Hirai, S., Naito, M., Qu, N., Hatayama, N., Hayashi, S., Mitobe, K., Furusawa, J., Mizoguchi, I., Kezuka, T., Goto, H., Suyama, K., Moriyama, H., Sakabe, K., and Itoh, M.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9(4) ページ: e96120
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0096120
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Immunosurveillance markers may predict patients who can discontinue imatinib therapy without relapse. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshimoto, T., Mizoguchi, I., Katagiri, S., Tauchi, T., Furusawa, J., Chiba, Y., Mizuguchi, J., Ohyashiki, J. H., and Ohyashiki, K.
  • 雑誌名: Oncoimmunology 巻: 3 ページ: e28861
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Down-regulated microRNA-148b in circulating PBMCs in chronic myeloid leukemia patients with undetectable minimal residual disease: A possible molecular classifier to stop imatinib safely. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ohyashiki, J. H., Ohtsuki, K., Mizoguchi, I., Yoshimoto, T., Katagiri, S., Umezu, T., and Ohyashiki, K.
  • 雑誌名: Drug Des. Devel. Ther. 巻: 8 ページ: 1151-1159
  • DOI: 10.2147/DDDT.S66812
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Immunological control of chronic myeloid leukemia leading to treatment-free remission. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mizoguchi, I., Yoshimoto, T., Katagiri, S., Furusawa, J., Chiba, Y., Mizuguchi, J., Tauchi, T., Ohyashiki, J. H., and Ohyashiki, K.
  • 雑誌名: J. Hematol. Transfus. 巻: 2(3) ページ: 1024
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] IL-27 exerts potent antitumor activity by promoting the differentiation of hematopoietic stem cells to M1-like antitumor macrophages and their mobilization. (2014)
  • 著者名/発表者名: Chiba, Y., Furusawa, J., Mizoguchi, I., Xu, M., Mizuguchi, J., and Yoshimoto, T.
  • 学会等名: 第43回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] IL-27 promotes the differentiation of hematopoietic stem cells into multipotent myeloid progenitor cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Furusawa, J., Chiba, Y., Mizoguchi, I., Xu, M., Mizuguchi, J., and Yoshimoto, T.
  • 学会等名: 第43回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] PepTivator® OVA-pulsed DCs can induce both OVA specific CD8+ and CD4+ T cells in mouse model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Nagaoka, K., Yoshimoto, T., Kamigaki, T. and Maekawa, R.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] Regulation of antitumor immune responses through differentiation and mobilization of hematopoietic stem cells by IL-27. (2014)
  • 著者名/発表者名: Chiba, Y., Mizoguchi, I., Hisada, M., Tsuchida, A., Mizuguchi, J., and Yoshimoto, T.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] IL-27 promotes the differentiation of hematopoietic stem cells into DC progenitor cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Furusawa, J., Chiba, Y., Mitobe, K., Mizoguchi, I., Mizuguchi, J., and Yoshimoto, T.
  • 学会等名: 13th International Symposium on Dendritic Cells, DC2014
  • 発表場所: Tours, France
  • 年月日: 2014-09-14 – 2014-09-18
• [学会発表] Contribution of IL-35 to maintaining the testicular immune privilege. (2014)
  • 著者名/発表者名: Terayama, H., Naito, M., Yoshimoto, T., Hirai, S., Qu, N., Kuramasu, M., Hatayama, N., Kanazawa, T., Suyama, K., Sakabe, K., and Itoh, M.
  • 学会等名: 第33回日本アンドロロジー学会学術大会
  • 発表場所: 軽井沢
  • 年月日: 2014-06-12 – 2014-06-13
• [学会発表] Induction of antigen specific T cells using PepTivator®-pulsed DCs. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahara, M., Goto, S., Miki, K., Saiwaki, S., Nagaoka, K., Matsushita, H., Kondo, T. Bohnenkamp, H., Yoshimoto, T., Maekawa, R., and Kamigaki, T.
  • 学会等名: International Society For Cellular Therapy 20th Annual Meeting 2014
  • 発表場所: Paris, France
  • 年月日: 2014-04-23 – 2014-04-26
• [学会発表] Induction of both OVA specific CD4+ and CD8+ T cells by using PepTivator® OVA-pulsed DCs in mouse model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Miki, K., Nagaoka, K., Bohnenkamp, H., Yoshimoto, T., Kamigaki, T. and Maekawa, R.
  • 学会等名: American Association for Cancer Research 105th Annual Meeting 2014
  • 発表場所: San Diego, California, USA
  • 年月日: 2014-04-05 – 2014-04-09