| 研究実績の概要 |
複製開始反応は、真核細胞においては大きく2段階の反応である。即ち、DNA2本鎖を巻き戻す複製時ヘリカーゼの複製開始点への不活性型でのローディング（pre-RC形成、細胞周期のG1期）と、複製時ヘリカーゼの活性化と複製フォークの確立（S期）。この過程に関わる因子は以下の４種類に大別できる。
(1). pre-RCに含まれ、複製フォークには含まれないもの； (2). pre-RC、複製フォークの両方に含まれるもの（Mcm2-7）； (3). pre-RC、複製フォーク共に含まれないが複製フォーク形成には必要（Sld2, Sld3, Dpb11）; (4). pre-RCに含まれないが、複製フォークには含まれる（Cdc45, GINS, Polε他）
これまでの解析結果はグループ(3)の因子（Sld2, Sld3, Dpb11）の会合により促進される開始複合体の形成過程そのものが、複製開始・抑制のスイッチとなっており、それらの会合がCDKによるリン酸化で直接制御されていることを示している。開始複合体にはこれらの他、グループ(4)の因子も含まれているが、それらの開始複合体形成における役割は不明である。今回、従来の突然変異体取得法を改良することで（論文投稿中）、グループ(3)(4)に含まれる全ての因子について、タイトな変異体を取得することができた。同時に、各因子特異的な抗体を作製し、ほぼ全ての因子について、特異的な抗体を得た。これらを組み合わせて解析に用いることにより、同一変異体より作製した、ひとつの細胞抽出液中において各因子の挙動を同時にかつ網羅的に解析することが可能となり、in vivo複製開始反応についての詳細な解析結果が得られつつある（論文投稿準備中）。この成果は、複製開始機構の理解に向けて重要な貢献となることが期待できる。
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