研究課題
これまで我々は、Rab27エフェクターの1つGranuphilinが、分泌顆粒の細胞膜への安定的接着（ドッキング）に必須であると同時に、その細胞膜との融合を抑制することを示してきた。すなわちGranuphilinは、ドッキングを促進し、膜融合を抑制するという、一見、相反する機能を有している。そこでその機能的意義を解明するために、生きた膵β細胞で、Granuphilinとインスリンを別々の蛍光色素で標識し、その細胞内動態を観察した。その結果、Granuphilinは確かに膜融合を抑制するが、その作用は一時的で、分泌刺激によりGranuphilinは分泌顆粒膜より解離し、顆粒の動きを増進させ、開口放出を可能にすることがわかった。また、Granuphilinの細胞内分布を超解像顕微鏡で観察し、安定的に細胞膜にドッキングした顆粒の部位に特異的に集積し、180 nmのクラスターを形成していることを見出した。また、別のRab27エフェクターExophilin8欠損マウスがグルコース依存性インスリン分泌低下を示すことを見出していたが、Exophilin8と細胞内で結合する新規分子を同定した。そしてその結合領域を同定し、本分子と結合できないExophilin8点変異体を見出した。この変異体は、野生型と異なり、Exophilin8欠損マウス膵島のインスリン分泌低下をレスキューすることができず、このタンパク質相互作用がExophilin8のインスリン分泌促進作用に必須であることがわかった。
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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J. Cell Sci.
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Sci. Rep.
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http://molend.showa.gunma-u.ac.jp/
