• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2012 年度 実績報告書

タイト結合の機能病理学-ヒト正常上皮を中心に

研究課題

研究課題/領域番号 24390089
研究種目

基盤研究(B)

研究機関札幌医科大学

研究代表者

澤田 典均  札幌医科大学, 医学部, 教授 (30154149)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワードタイト結合 / クローディン / PKC / EMT / 膵癌
研究概要

本年度は,1.マウステラトーマF9細胞を用いたクローディン-6(Cldn6)接着シグナルと上皮分化について,2.正常ヒト子宮内膜上皮細胞及び子宮内膜癌細胞のタイト結合に対する性ホルモンの影響3.膵癌細胞のEMTに対するPKCα阻害剤の効果,を検討した.
1.F9細胞にCldn6を発現させると、細胞接着装置および微絨毛の形成を伴う上皮細胞分化を認めた。第二細胞外ドメインを欠くCldn6を導入したF9細胞では、上皮分化が見られなかった。さらにCldn6のC末端に存在するY196およびY200の2つのチロシン残基、ならびにそれらのリン酸化が上皮分化誘導に必須であることが明らかになった。免疫沈降法および各種阻害剤による解析から、活性型Srcファミリー・キナーゼがCldn6と共役して上皮分化を誘導していた。
2.ヒト正常子宮内膜上皮細胞ではcldn-1,-3,-4,-7,occludinの発現が確認され、プロゲステロンに反応してcldn-3,-4の増加を認めた。この変化は、月経周期における変化と同様であった。内膜癌細胞株(Sawano)は、エストロゲンに反応しcldn-3,-4の増加が認められた。これらの変化には,甑PK経路が関与しており、内膜癌細胞ではさらにhedgehog経路も関与していた。Cldn-4は,Welch菌毒素(CPE)のレセプターであるが,正常ヒト子宮内膜上皮細胞にはまったく殺細胞性を示さず,子宮内膜癌細胞にのみ殺細胞性が認められた。
3.TGF-βおよび低酸素で誘導したEMTに対するPKCα阻害剤の効果を,cldn-1の変化を指標に解析した.PKCαは膵癌で高発現しており,PKCα阻害剤はEMT誘導転写因子を抑制し,EMTによるcldn-1などのタイト結合分子の発現や,タイト結合機能の変化を抑制する効果があることが判明した.一方,正常細胞ではPKCα阻害剤はタイト結合分子の発現を誘導したことから,細胞の分化を誘導する可能性が示唆された.PKCαはタイト結合分子の発現調節に強く関与し,膵癌細胞と正常膵管上皮細胞は異なるメカニズムで制御されていることが考えられた.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

1.マウステラトーマF9細胞を用いたクローディン-6(Cldn6)接着シグナルと上皮分化について,2.正常ヒト子宮内膜上皮細胞及び子宮内膜癌細胞のタイト結合に対する性ホルモンの影響,3.膵癌細胞のEMTに対するPKCα阻害剤の効果について結果を得た。

今後の研究の推進方策

1)三細胞接着部に局在するトリセルリンの調節機構;2)ヒト癌細胞のJAM-Aの発現を中心に行う。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件)

  • [雑誌論文] Behavior of tricellulin during destruction and formation of tight junctions under various extracellular calcium conditions. Cell2013

    • 著者名/発表者名
      Takasawa A, Kojima T, Ninomiya T, Tsujiwaki M, Murata M, Tanaka S, Sawada N.
    • 雑誌名

      Cell Tissue Res.

      巻: 351(1) ページ: 73-84

    • DOI

      10.1007/s00441-012-1512-7.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The role of IL-33 and its receptor ST2 in human nasal epithelium with allergic rhinitis.2012

    • 著者名/発表者名
      Kamekura R, Kojima T, Takano K, Go M, Sawada N, Himi T.
    • 雑誌名

      Clin Exp Allergy

      巻: 42(2) ページ: 218-228

    • DOI

      10.1111/j.1365-2222.2011.03867.x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Claudin-4-targeted therapy using Clostridium perfringens enterotoxin for prostate cancer.2012

    • 著者名/発表者名
      Maeda T, Murata M, Chiba H, Takasawa A, Tanaka S, Kojima T, Masumori N, Tsukamoto T, Sawada N.
    • 雑誌名

      Prostate.

      巻: 72(4): ページ: 351-360

    • DOI

      10.1002/pros.21436.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Regulation of interleukin-33 and thymic stromal lymphopoietin in human nasal fibroblasts by proinflammatory cytokines.2012

    • 著者名/発表者名
      Nomura K, Kojima T, Fuchimoto J, Obata K, Keira T, Himi T, Sawada N.
    • 雑誌名

      Laryngoscope.

      巻: 122(6) ページ: 1185-1192

    • DOI

      10.1002/lary.23261.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Epidermal growth factor modulates claudins and tight junctional functions in ovarian cancer cell lines.2012

    • 著者名/発表者名
      Ogawa M, Kojima T, Someya M, Nomura K, TakasawaA, Murata M, Tanaka S, Saito T, Sawada N.
    • 雑誌名

      Histochem Cell Biol.

      巻: 138(2): ページ: 323-338

    • DOI

      10.1007/s00418-012-0956-x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Regulation of tight j unctions in human normal pancreatic duct epithelial cells and cancer cells.2012

    • 著者名/発表者名
      Kojima T, Sawada N.
    • 雑誌名

      Ann N Y Acad Sci.

      巻: 1257(1) ページ: 85-92

    • DOI

      10.1111/j.1749-6632.2012.06579.x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Targeting claudin-4 in human pancreatic cancer.2012

    • 著者名/発表者名
      Kojima T, Kyuno D, Sawada N.
    • 雑誌名

      Expert Opin Ther Targets.

      巻: 16(9) ページ: 881-887

    • DOI

      10.1517/14728222.2012.708340.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Hop water extract inhibits double-stranded RNA-induced thymic stromal lymphopoietin release from human nasal epithelial cells.2012

    • 著者名/発表者名
      Fuchimoto J, Kojima T, Kobayashi N, Ohkuni T, Ogasawara N, Masaki T, Obata K, Nomura K, Kondoh A, Shigyo T, Himi T, Sawada N.
    • 雑誌名

      Am J Rhinol Allergy.

      巻: 26(6): ページ: 433-438

    • DOI

      10.2500/ajra.2012.26.3814.

    • 査読あり

URL: 

公開日: 2014-07-16  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi