遺伝子量補正型ＲＮＡｉ誘導法の確立とそれに基づくパーキンソン病新規治療法の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24390226
• 研究機関: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
• 研究代表者: 北條 浩彦 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所 神経薬理研究部, 室長 (60238722)
• 研究分担者: 永井 義隆 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所 疾病研究第4部, 室長 (60335354)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: RNAi / パーキンソン病 / 多重重複変異 / α-シヌクレイン / ショウジョウバエ

研究実績の概要

パーキンソン病のkey遺伝子であるα-シヌクレイン遺伝子は、その塩基配列変化（変異）だけでなく、正常遺伝子の遺伝子量増幅（多重重複変異）によってもパーキンソン病の発症に関与する。本研究は、その様な多重重複変異によるパーキンソン病に対して新しい技術となる遺伝子量補正型RNAiノックダウン法を開発し、それを用いた新しい治療戦略（治療法）の道を開くことを目的とする。今回の新技術の開発は、応募者が長年研究してきた対立遺伝子特異的RNAiノックダウンのノウハウを基盤とし、患者細胞そしてショウジョウバエモデルを用いた実験と検証によってその実現を目指した。
本年度は、パーキンソン病（PD）モデルショウジョウバエを用いて遺伝子量補正型RNAiノックダウンを実施し、α-シヌクレイン遺伝子発現抑制の程度とPDモデルショウジョウバエの運動能力との間に逆相関があることを見出した。さらに、α-シヌクレイン遺伝子の多重重複変異を有する患者由来の繊維芽細胞を用いて遺伝子量補正型RNAiノックダウン処理を行い、α-シヌクレイン遺伝子の発現量の正常化を確認し、さらにオフターゲット効果がほとんど無いことも観察した。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Normalization of overexpressed alpha-synuclein causing Parkinson’s disease by a moderate gene silencing with RNA interference. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., Suzuki M., Fukuoka M., Fujikake N., Watanabe S., Murata M., Wada K., Nagai Y., and *Hohjoh H.
  • 雑誌名: Mol Ther Nucleic Acids 巻: 4 ページ: e241
  • DOI: 10.1038/mtna.2015.14
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] A novel measurement of allele discrimination for assessment of allele-specific silencing by RNA interference. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M. and *Hohjoh H.
  • 雑誌名: Mol Biol Rep 巻: 41 ページ: 7115-7120
  • DOI: 10.1007/s11033-014-3586-7. Epub 2014 Jul 19.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Gene silencing mediated by endogenous microRNAs under heat stress conditions in mammalian cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fukuoka M., Yoshida M., Eda A., Takahashi M., *Hohjoh H.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 9(7) ページ: e103130
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0103130. eCollection 2014.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Disease-associated mutations of TDP-43 promote turnover of the protein through the proteasomal pathway. (2014)
  • 著者名/発表者名: Araki W., Minegishi S., Motoki K., Kume H., Hohjoh H., Araki YM., and Tamaoka A.
  • 雑誌名: Mol Neurobiol 巻: 50 ページ: 1049-1058
  • DOI: 10.1007/s12035-014-8644-6. Epub 2014 Jan 30.
  • 査読あり
• [学会発表] 熱ストレス下におけるマイクロRNAの遺伝子発現制御に関する解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 福岡聖之、吉田満史子、枝亜希子、高橋理貴、北條浩彦.
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜）
  • 年月日: 2014-11-26
• [学会発表] 老化モデルマウスおよび正常加齢マウスにおけるmiR-29の発現上昇とそれに伴うコラーゲンタイプIVの発現低下 (2014)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦、高橋理貴、枝亜希子、福島達伸．
  • 学会等名: 第59回日本人類遺伝学会大会
  • 発表場所: タワーホール船堀（東京）
  • 年月日: 2014-11-21
• [学会発表] Application of atypical RNAi for human diseases. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Nakamura Y, and Hohjoh H.
  • 学会等名: Joint Australia and Japan RNA (jajRNA) meeting
  • 発表場所: the University of Technology, Sydney, Australia
  • 年月日: 2014-11-03
• [学会発表] Gene silencing mediated by endogenous miRNAs under heat stress conditions in mammalian cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fukuoka M, Yoshida M, Eda A, Takahashi M, and Hohjoh H.
  • 学会等名: 64rd Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: San Diego Convention Center, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2014-10-20
• [学会発表] Early drug responses that are followed by an acquired drug resistance in non-small cell lung cancer cells exposed to gefitinib. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Fukuoka M, and Hohjoh H.
  • 学会等名: 64rd Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: San Diego Convention Center, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2014-10-19
• [学会発表] デジタルPCRを利用した新しい研究の可能性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 学会等名: ライフテクノロジーズ・オンラインセミナー
  • 発表場所: ライフテクノロジーズジャパン株式会社本社(東京）
  • 年月日: 2014-05-29
  • 招待講演
• [図書] 医学のあゆみ (2014)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 総ページ数: 1
  • 出版者: 医歯薬出版株式会社