第四世代膵島分離技術の確立とその臨床応用化

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24390316
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 野口 洋文 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (50378733)
• 研究分担者: 藤原 俊義 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (00304303) ; 齊藤 一誠 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 准教授 (90404540)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 膵島移植 / 臓器保存液 / 膵島純化 / JNK抑制ペプチド

研究概要

本研究では、第四世代膵島分離技術を確立しその技術の臨床応用化することを目的としている。申請代表者は、
ハーバード大学、京都大学、ベイラー研究所で膵島移植を実施し、第三世代膵島分離技術を確立した。本研究ではその技術をさらに発展させ、第四世代膵島分離技術を確立することを目的としている。平成24年度は、1.JNK抑制ペプチドの安全性確認、2.新規保存溶液(HN-1溶液)の有効性の確認、3.連続比重・密度勾配による純化の検討、の3つを行った。
1.JNK抑制ペプチドの安全性確認:膵管保護溶液にJNK抑制ペプチドを添加した場合の有効性および、JNK抑制ペプチドのマウスへの直接投与による安全性の確認は以前に行われていた。今回は、JNK抑制ペプチドを膵管から注入した場合の安全性の確認を行った。JNK抑制ペプチドを膵管から注入した場合、純化後の膵島浮遊液に含まれるJNK抑制ペプチドは検出感度以下となっており、膵島分離中にJNK抑制ペプチドがほぼ完全に除去されることが確認された。また、分離膵島のマウスへの移植による、副作用の発現は確認されなかった。
2.新規臓器保存液(HN-1溶液)の有効性の確認:今回、新規臓器保存液(HN-1溶液)を開発し、UW溶液およびMK溶液との比較を行った。UW溶液およびHN-1溶液によるブタ膵保存を行った場合、HN-1溶液を用いたほうが膵島分離による膵島収量は有意に高いことが確認された。また、MK溶液との比較でも、HN-1溶液を用いた時の膵島収量の方が高いことが確認された。
3.連続比重・密度勾配による純化の検討:今回、高比重と低比重の溶液の浸透圧を変化させ、連続比重勾配および連続密度勾配の純化溶液を作成し純化を行った。従来法と比較した場合、連続比重・密度勾配による純化の方が膵島純度が高いことが確認された。膵島収量は2群間で有意差は認められなかった。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成24年度に計画した通り、研究が進んでいる。

今後の研究の推進方策

平成24年度は計画した通り、順調に研究が進んでおり、このまま計画書に従って研究を遂行していく予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Monitoring transplanted adipose tissue-derived stem cells combined with heparin in the liver by fluorescence imaging using quantum dots. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yukawa H, Watanabe M, Kaji N, Okamoto Y, Tokeshi M, Miyamoto Y, Noguchi H, Baba Y, Hayashi S.
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: 33 ページ: 2177-2186
  • DOI: 10.1016/j.biomaterials.2011.12.009.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Secretory Unit of Islet Transplant Objects (SUITQ) Index Can Predict Severity of Hypoglycemic Episodes in Clinical Islet Cell Transplantation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takita M, Matsumoto S, Qin H, Noguchi H, Shimoda M, Chujo D, Itoh T, Sugimoto K, Onaca N, Naziruddin B, Levy MF.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 91-98
  • DOI: 10.3727/096368911X580617
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel gene expression system for detecting viable bladder cancer cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueki H, Watanabe M, Kaku H, Huang P, Li SA, Ochiai K, Hirata T, Noguchi H, Yamada H, Takei K, Nasu Y, Kashiwakura Y, Kumon H.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 41 ページ: 135-140
  • DOI: 10.3892/ijo.2012.1417.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improvement of porcine islet isolation by inhibition of trypsin activity during pancreas preservation and digestion using α-antitrypsin. (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimoda M, Noguchi H, Fujita Y, Takita M, Ikemoto T, Chujo D, Naziruddin B, Levy MF, Kobayashi N, Grayburn PA, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 465-471
  • DOI: 10.3727/096368911X605376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of osmolality of density gradient for human islet purification. (2012)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Naziruddin B, Shimoda M, Fujita Y, Chujo D, Takita M, Peng H, Sugimoto K, Itoh T, Kobayashi N, Onaca N, Levy MF, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 493-500
  • DOI: 10.3727/096368911X605402
  • 査読あり
• [雑誌論文] Islet purification method using large bottles effectively achieves high islet yield from pig pancreas. (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimoda M, Noguchi H, Fujita Y, Takita M, Ikemoto T, Chujo D, Naziruddin B, Levy MF, Kobayashi N, Grayburn PA, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 501-508
  • DOI: 10.3727/096368911X605411
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of ulinastatin, gabexate mesilate, and nafamostat mesilate in preservation solution for islet isolation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Naziruddin B, Jackson A, Shimoda M, Fujita Y, Chujo D, Takita M, Peng H, Sugimoto K, Itoh T, Kobayashi N, Ueda M, Okitsu T, Iwanaga Y, Nagata H, Liu X, Kamiya H, Onaca N, Levy MF, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 509-516
  • DOI: 10.3727/096368911X605420
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fresh islets are more effective for islet transplantation than cultured islets. Cell (2012)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Naziruddin B, Jackson A, Shimoda H, Ikemoto T, Fujita Y, Chujo D, Takita M, Peng H, Sugimoto K, Itoh T, Kobayashi N, Onaca N, Levy HF, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 517-523
  • DOI: 10.3727/096368911X605439
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adverse events in clinical islet transplantation : one institutional experience. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takita M, Matsumoto S, Noguchi H, Shiuoda M, Ikemoto T, Chujo D, Tamura Y, Olsen GS, Naziruddin B, Purcell K, Onaca N, Levy MF.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 547-551
  • DOI: 10.3727/096368911X605466
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved pancreatic islet isolation outcome in autologous transplantation for chronic pancreatitis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Naziruddin B, Matsumoto S, Noguchi H, Takita M, Shimoda M, Fujita Y, Chujo D, Tate C, Onaca N, Lamont J, Kobayashi N, Levy MF.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 553-558
  • DOI: 10.3727/096368911X605475
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transplantation of osteogenically differentiated mouse iPS cells for bone repair. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Misawa H, Nakahara H, Noguchi H, Yoshida A, Kobayashi N, Tanaka M, Ozaki T.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 591-600
  • DOI: 10.3727/096368911X605529
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryopreservation of human adipose tissue-derived stem/progenitor cells using the silk protein sericin. (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto Y, Oishi K, Yukawa H, Noguchi H, Sasaki M, Iwata H, Hayashi S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 617-622
  • DOI: 10.3727/096368911X605556
  • 査読あり
• [雑誌論文] Attenuation of murine graft-versus-host disease by a tea polyphenol. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanamune J, Iwanaga Y, Kina T, Noguchi H, Matsumura K, Uemoto S, Hyon SH.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 巻: 21 ページ: 909-918
  • DOI: 10.3727/096368911X623934
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preclinical biodistribution and safety study of reduced expression in immortalized cells/Dickkopf-3-encoding adenoviral vector for prostate cancer gene therapy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto M, Watanabe M, Kaku H, Li SA, Noguchi H, Ueki H, Sakaguchi M, Huh NH, Nasu Y, Kumon H.
  • 雑誌名: Oncol Rep. 巻: 28 ページ: 1645-1652
  • DOI: 10.3892/or.2012.2001.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A combined continuous density/osmolality gradient for supplemental purification of human islets. (2012)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Naziruddin B, Shimoda M, Chujo D, Takita M, Sugimoto K, Itoh T, Onaca N, Levy MF, Matsumoto S.
  • 雑誌名: Cell Med. 巻: 3 ページ: 33-41
  • DOI: 10.3727/215517912X639388
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel positive-charged nanoparticles for efficient magnetic resonance imaging of islet transplantation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Oishi K, Noguchi H, Saito H, Yukawa H, Miyamoto Y, Ono K, Murase K, Sawada M, Hayashi S.
  • 雑誌名: Cell Med. 巻: 3 ページ: 43-49
  • DOI: 10.3727/215517912X639397
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differentiation of Mouse Pancreatic Stem Cells Into Insulin-Producing Cells by Recombinant Sendai Virus-Mediated Gene Transfer Technology. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yukawa H, Noguchi H, Oishi K, Miyamoto Y, Inoue M, Hasegawa M, Hayashi S, Baba Y.
  • 雑誌名: Cell Med. 巻: 3 ページ: 51-61
  • DOI: 10.3727/215517912X639487
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryopreservation of Induced Pluripotent Stem Cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto Y, Noguchi H, Yukawa H, Oishi K, Matsushita K, Iwata H, Hayashi S.
  • 雑誌名: Cell Med. 巻: 3 ページ: 89-95
  • DOI: 10.3727/215517912X639405
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of mouse STO feeder cell lines that confer resistance to several types of selective drugs. (2012)
  • 著者名/発表者名: Saitoh I, Sato M, Iwase Y, Inada E, Nomura T, Akasaka E, Yamasaki Y, Noguchi H.
  • 雑誌名: Cell Med. 巻: 3 ページ: 97-102
  • DOI: 10.3727/215517912X639414
  • 査読あり
• [学会発表] 膵島移植・再生療法の現状と展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第12回日本先進糖尿病治療研究会
  • 発表場所: 岡山(招待講演)
  • 年月日: 2012-12-01
• [学会発表] 膵島移植と再生医療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第11回全国ヤングDMカンファレンス
  • 発表場所: 大阪(招待講演)
  • 年月日: 2012-11-23
• [学会発表] 膵島移植と再生医療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第39回日本臓器保存生物医学会
  • 発表場所: 福島(招待講演)
  • 年月日: 2012-11-17
• [学会発表] 膵島移植の現況 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第8回信州難治性肝疾患治療研究会
  • 発表場所: 長野(招待講演)
  • 年月日: 2012-09-28
• [学会発表] 膵島移植と膵島再生療法について (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第5回AWA DM.com
  • 発表場所: 徳島(招待講演)
  • 年月日: 2012-09-08
• [学会発表] 膵島移植の現況と展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 平成24年度愛媛外科会総会
  • 発表場所: 愛媛(招待講演)
  • 年月日: 2012-08-04
• [学会発表] 膵島移植の現況と展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野口洋文
  • 学会等名: 第11回再生医療学会総会
  • 発表場所: 神奈川(招待講演)
  • 年月日: 2012-06-13