ハイスループットスクリーニングを利用した、婦人科がん薬剤耐性克服に向けた治療戦略

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24390375
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 八重樫 伸生 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00241597)
• 研究分担者: 豊島 将文 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 非常勤講師 (70451581)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: スクリーニング / 薬剤耐性 / 婦人科がん / 化学療法 / シスプラチン

研究概要

本研究は、婦人科がん治療で頻用される抗がん剤であるシスプラチンに焦点を絞った上で、シスプラチン耐性がん細胞の薬剤感受性を亢進する分子の探索を目的とした研究である。全ゲノムスケールsiRNAライブラリーを利用したハイスループット・スクリーニングで少量のCDDP投与と合成致死作用を示す分子を探索する。この研究は新規治療標的の同定による創薬および臨床応用への橋渡しを目的としている。
本年度の研究成果は以下のとおりである。
(A)：スクリーニングとは独立したsiRNAおよび細胞株を用いたvalidation assay
昨年度に行ったスクリーニングおよびBioinfomatics解析によって6650遺伝子から33遺伝子に絞り込みを行った。本年度はこれらの33遺伝子について異なる角度からのvalidation assaysを行った。スクリーニング結果が遺伝子特異的な現象である事を確認するために、primary screeningとは独立した2種類のシスプラチン耐性細胞株ペアーであるA2780/A2780CP70およびPE01/PE04の4種の細胞株を使用（A2780CP70はスクリーニングに使用）、さらにスクリーニングとは異配列のsiRNAを用いて合成致死作用の有無についてvalidation assayを行った。
(B): シスプラチン添加前後の遺伝子変化の測定
上記33遺伝子に関してシスプラチン添加前後の発現量解析をRT-PCRにて行った。(A)と(B)の実験結果を検討してシスプラチン感受性を改善する標的分子として4分子を抽出した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

primary screeningおよびvalidation assayを通じて候補遺伝子として4分子を抽出した。これらの遺伝子群は、今までシスプラチン耐性との関わりが報告されていない新規分子である。in vivoモデルでの実験およびin vitroでのメカニズム解析の結果によってはこれらの分子から新規治療標的が見出される可能性があると考える。

今後の研究の推進方策

昨年度までの検討で抽出した4分子に焦点を絞り、in vivoでの検証実験およびin　vitroでのメカニズム解析を行う予定である。これらの結果をまとめて論文報告したい。

次年度の研究費の使用計画

次年度使用額は今年度の研究を効率的に推進したことに伴い発生した未使用額である。
平成26年度請求額と合わせ、平成26年度の研究遂行に使用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical outcome of pelvic exenteration in patients with advanced or recurrent uterine cervical cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka S, Nagase S, Kaiho-Sakuma M, Nagai T, Kurosawa H, Toyoshima M, Tokunaga H, Otsuki T, Utsunomiya H, Takano T, Niikura H, Ito K, Yaegashi N.
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol 巻: 19 ページ: 133-138
  • DOI: 10.1007/s10147-013-0534-9.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular Pathogenesis of Uterine Serous Carcinoma (2014)
  • 著者名/発表者名: Satoru Nagase, Fumihiko Suzuki, Hideki Tokunaga ,Masafumi Toyoshima, Hiroki Utsunomiya ,Hitoshi Niikura , Nobuo Yaegashi
  • 雑誌名: Curr Obstet Gynecol Rep 巻: 3 ページ: 33-39
  • DOI: 10.1007/s13669-013-0069-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Paclitaxel-carboplatin for advanced or recurrent carcinosarcoma of the uterus: the Japan Uterine Sarcoma Group and Tohoku Gynecologic Cancer Unit Study (2014)
  • 著者名/発表者名: Tadao Takano,Takeo Otsuki,Hideki Tokunaga,Masafumi Toyoshima , Hiroki Utsunomiya ,Satoru Nagase , Hitoshi Niikura , Kiyoshi Ito ,Nobuo Yaegashi , Hidekazu Yamada ,Toru Tase ,Masahiro Kagabu , Tadahiro Shoji ,Toru Sugiyama , Naoki Sato, Junzo Kigawa,et.al
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s10147-013-0658-y
  • 査読あり
• [学会発表] 卵巣がん転移を標的にした創薬:スフィンゴ脂質の利用
  • 著者名/発表者名: 北谷和之・豊島将文・増子さつき・重田昌吾・石橋ますみ・八重樫伸生
  • 学会等名: 第12回日本婦人科がん分子標的研究会
  • 発表場所: 東大寺総合文化センター、奈良市
• [学会発表] 卵巣明細胞腺癌におけるPAI-1の発現と血栓症発症の関連についての検討
  • 著者名/発表者名: 増子さつき・豊島将文・北谷和之・重田昌吾・八重樫伸生
  • 学会等名: 第65回日本産科婦人科学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] 卵管上皮内腺癌におけるDNA二本鎖切断とp53発現の免疫組織学的検討
  • 著者名/発表者名: 重田昌吾・豊島将文・増子さつき・北谷和之・八重樫伸生
  • 学会等名: 第65回日本産科婦人科学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] Identification of Targeted Therapies for Ovarian Cancers by Functional Genomics
  • 著者名/発表者名: Masafumi Toyoshima, Kazuyuki Kitatani, Satsuki Mashiko, Shogo Shigeta and Nobuo Yaegashi
  • 学会等名: 第65回日本産科婦人科学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市