| 研究課題/領域番号 |
24390403
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
佐和 貞治 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (10206013)
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| 研究分担者 |
上野 博司 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (20381965)
橋本 壮志 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (60515279)
天谷 文昌 京都府立医科大学, 医学研究科, 客員講師 (60347466)
倉橋 清泰 横浜市立大学, 医学研究科, 准教授 (50234539)
森山 潔 杏林大学, 医学部, 助教 (10296717)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 肺炎 / グラム陰性菌 / V抗原 / III型分泌システム / ワクチン / 血清疫学調査 / 敗血症 |
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| 研究概要 |
グラム陰性菌のIII型分泌システムのV抗原タンパクに関する抗体価についての健常人及び感染者での幅広い血清疫学調査を計画した。
まず、緑膿菌のV抗原遺伝子をクローニングし、遺伝子組み換えV抗原を作成し、V抗原に対する血清抗体価測定システムを構築した。臨床患者より得た血清を対象に感染罹患・重症化等との相関を見る血清疫学調査を実施している。同様に、エルシニア菌、ビブリオ菌、エアロモナス菌、病原性大腸菌、赤痢菌、サルモネラ菌よりV抗原相同遺伝子をPolymerase-chain reaction (PCR)法にてクローニングし、大腸菌遺伝子組換えタンパク発現システムを用いて、遺伝子組換えV抗原相同タンパクを精製する計画を進行中である。病原体V抗原遺伝子をPCR法にてクローニングする際のDNAテンプレートは、病原体そのものではなく、可能な限り国内の病原菌に専門分野の研究者から供与を受けた(ATCCコレクションから病原性菌のゲノムDNAを購入し、それをテンプレートとしてPCR増幅法で対象遺伝子をクローニングする準備を整えた)。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
初年度の計画通り、ほぼ当初の予定を達成した。
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| 今後の研究の推進方策 |
緑膿菌で確立したV抗原抗体価測定システムを、二年度以後には、エルシニア菌、ビブリオ菌、エアロモナス菌、病原性大腸菌、赤痢菌、サルモネラ菌に拡張し、Polymerase-chain reaction(PCR)法にてクローニングしたV抗原相同遺伝子を発現ベクターに組み込み、大腸菌遺伝子組換えタンパクを精製する。それらを用いて、すでに採取を開始している患者血清中の抗体価の測定を行う。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
24年度に研究が予想以上に順調に進展し、物品費の支出を抑えることが出来たため、24年度助成金(260万円)の未使用額を次年度に繰り越すこととなった。エルシニア菌、ビブリオ菌、エアロモナス菌、病原性大腸菌、赤痢菌、サルモネラ菌のゲノムより、Polymerase-chain reacti。n(PCR)法にてV抗原相同遺伝子をクローニングし、発現ベクターに組み込み、大腸菌遺伝子組換えタンパクを精製する。
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