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2014 年度 実績報告書

分画化歯根膜細胞とのブレンドによる培養骨膜シートの高機能化と新治療法への展開

研究課題

研究課題/領域番号 24390465
研究機関新潟大学

研究代表者

奥田 一博  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (00169228)

研究分担者 川瀬 知之  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (90191999)
永田 昌毅  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (10242439)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワード骨膜細胞 / 歯根膜細胞 / 共培養 / 骨組織再生 / 血管新生
研究実績の概要

骨膜片組織培養における幹細胞様未分化細胞の増幅については、幹細胞様培地を用いることで、細胞増殖とECMの蓄積亢進による多層化・肥厚化が顕著に促進された。このなかで、CD146陽性の周皮細胞様細胞の占める比率が上昇することを明らかにした。これらの細胞は、in vitroでは骨芽細胞への分化誘導に対する応答性が低いが、ヌードマウスに移植すると異所性に骨様組織を形成した。細胞の濃縮(高密度化)は骨膜中の骨芽細胞層の形態的特徴からも必須なプロセスと理解されることから、これに続く効率的な分化誘導法の確立によって、骨原性の高い移植物に調製できる可能性が見えてきた。
また、骨膜シートの血管新生に及ぼす影響については、動物移植ならびに鶏卵漿尿膜(CAM)の実験系で検証中である。特に後者実験系では、骨膜シートによる血管誘導・新生が顕著であることが確認された。さらに、ヒト血管内皮細胞(HUVEC)との複合化を試みたが、明らかな協調作用はまだ確認されていない。
骨芽細胞へ分化誘導した骨膜シートはヌードマウス移植実験系で、血管新生と破骨細胞の誘導効果が顕著であることを発見したが、上記の実験結果や最近の論文から、移植前のin vitroでの分化誘導が中期的なスパンでの骨再生にとって有効かどうか見極めていく必要がある。
一方、歯根膜細胞入手の機会が1回しかなく、貴重なサンプルとして増幅し凍結保存した。共培養に先立って、骨膜シートの培養上清の影響を検討したところ、幹細胞様培地の培養上清が歯根膜細胞の増殖を有意に促進することを確認できた。現在、分画化のための基礎情報を得る目的から、表面抗原の解析を行ない、文献的資料と比較検討している。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (11件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (7件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] X-ray and ultraviolet C irradiation-induced γ-H2AX and p53 formation in normal human periosteal cells in vitro: markers for quality control in cell therapy.2015

    • 著者名/発表者名
      Kawase T, Kamiya M, Hayama K, Nagata M, Okuda K, Yoshie H, Burns DM, Tsuchimochi M, Nakata K.
    • 雑誌名

      Cytotherapy

      巻: 17 ページ: 112-123

    • DOI

      http://dx.doi.org/10.1016/j.jcyt.2014.08.005

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] The heat-compression technique for the conversion of platelet-rich fibrin preparation to a barrier membrane with a reduced rate of biodegradation.2015

    • 著者名/発表者名
      Kawase T, Kamiya M, Kobayashi M, Tanaka T, Okuda K, Wolff LF, Yoshie H.
    • 雑誌名

      Journal of Biomedical Materials Research B: Applied Biomaterials

      巻: 103 ページ: 825-831

    • DOI

      http://dx.doi.org/10.1002/jbm.b.33262

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Real-time quantitative PCR and flow-cytometric analyses of cell adhesion molecules expressed in human cell-multilayered periosteal sheets in vitro.2014

    • 著者名/発表者名
      Kawase T, Uematsu K, Kamiya M, Nagata M, Okuda K, Burns DM, Nakata K, Yoshie H.
    • 雑誌名

      Cytotherapy

      巻: 16 ページ: 653-661

    • DOI

      http://dx.doi.org/10.1016/j.jcyt.2013.11.003

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Platelet-rich fibrin(PRF)はPlatelet-rich plasma(PRP)と同程度の血管新生効果を有する2015

    • 著者名/発表者名
      小林美登、川瀬知之、奥田一博、佐伯万騎男、吉江弘正
    • 学会等名
      第14回日本再生医療学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
    • 年月日
      2015-03-21
  • [学会発表] 酸化ストレス刺激ヒト骨膜細胞モデルにおけるDNA修復履歴を指標とした品質管理2015

    • 著者名/発表者名
      川瀬知之、神谷真菜、羽山和秀、永田昌毅、奥田一博、吉江弘正、土持 眞、中田 光
    • 学会等名
      第14回日本再生医療学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
    • 年月日
      2015-03-21
  • [学会発表] X線局所照射による唾液腺傷害とモデルマウスの作製:系統間の差異2015

    • 著者名/発表者名
      神谷真菜、川瀬知之、羽山和秀、奥田一博、佐伯万騎男、土持 眞、吉江弘正
    • 学会等名
      第14回日本再生医療学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
    • 年月日
      2015-03-21
  • [学会発表] 骨膜シート調製における無血清培地に関する基礎的研究2015

    • 著者名/発表者名
      渡辺真理、藤本陽子、牛木隆志、川瀬知之、奥田一博、永田昌毅、伊藤 彰、吉江弘正、中田 光
    • 学会等名
      第14回日本再生医療学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県)
    • 年月日
      2015-03-21
  • [学会発表] 自己多血小板フィブリン膜とβ-TCPによる歯周組織再生効果:症例報告2014

    • 著者名/発表者名
      奥田一博、中島 悠、小林美登、神谷真菜、堀水 慎、川瀬知之、吉江弘正
    • 学会等名
      第141回秋季日本歯科保存学会学術大会
    • 発表場所
      山形テルサ(山形県)
    • 年月日
      2014-10-30
  • [学会発表] X線局所照射による唾液腺傷害とT細胞の関与2014

    • 著者名/発表者名
      神谷真菜、川瀬知之、奥田一博、佐伯万騎男、吉江弘正
    • 学会等名
      平成26年度新潟歯学会第1回例会
    • 発表場所
      新潟大学歯学部(新潟県)
    • 年月日
      2014-07-12
  • [学会発表] 自己血由来多血小板フィブリン膜による歯周組織再生効果2014

    • 著者名/発表者名
      中島 悠、奧田一博、小林美登、神谷真菜、堀水 慎、川瀬知之、吉江弘正
    • 学会等名
      第57回春季日本歯周病学会学術大会
    • 発表場所
      長良川国際会議場(岐阜県)
    • 年月日
      2014-05-23
  • [図書] New Trends in Tissue Engineering and Regenerative Medicine-Official book of the Japanese Society for Regenerative Medicine.2014

    • 著者名/発表者名
      Kawase T, Okuda K, Nagata M, Yoshie H
    • 総ページ数
      119
    • 出版者
      InTech Publishing Limited

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公開日: 2016-06-01  

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