| 研究課題/領域番号 |
24390467
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
栗原 英見 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 教授 (40161765)
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| 研究分担者 |
加藤 功一 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 教授 (50283875)
水野 智仁 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 助教 (60325181)
内田 雄士 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 助教 (40363080)
岩田 倫幸 広島大学, 大学病院, 助教 (30418793)
應原 一久 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 助教 (80550425)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / セメント芽細胞 / 歯周組織再生 / セメント質形成 / 歯周靭帯細胞 / マイクロRNA |
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| 研究概要 |
歯根部を取り囲むセメント質と歯周靭帯は歯の生理的機能を発現する上で極めて重要な役割を担っているが、歯周炎によって喪失する組織でもあるため、セメント質と歯周靭帯を再生することは歯周組織の構造的および機能的再生においても最も重要である。
平成24年度における本研究では、効果的な歯周組織再生を最終的な目的として、セメント芽細胞に特異的な遺伝子発現を、骨芽細胞などの細胞への分化関連遺伝子およびマイクロRNAの発現を網羅的に検討するという観点から研究を推進した。平成24年度に行なった研究の具体的な内容として、ヒトセメント芽細胞株(HCEM-T)とヒト骨髄間葉系幹細胞(MSC)およびヒト歯肉線維芽細胞(HGF)・ヒト歯周靭帯細胞(HPL cell)・ヒト骨芽細胞(HOB)を用いて、(1)未分化マーカー転写因子および関連遺伝子(2)骨・軟骨・脂肪・筋分化関連マーカー(3)HPL cell, HGF, HCEM-T特異的遺伝子(4)未分化状態維持に関与する低酸素関連遺伝子の網羅的解析およびマイクロRNAの網羅的解析をおこなった。得られた結果として、
1.未分化マーカー転写因子および関連遺伝子などの網羅的解析において、計92遺伝子中、MSCと比較してHCEMに特徴的な発現を認めた遺伝子は13種であった。
2.マイクロRNAの網羅的解析において、374種のうち、HCEM-Tにおいて高発現を示した16種のマイクロRNAが確認された。
以上の結果により、HCEM-Tにおいて特徴的な発現を示すmRNAおよびマイクロRNAが同定された。この結果により、MSCのセメント芽細胞への分化に対して重要な役割を果たす可能性のある遺伝子が明らかになり、これらの遺伝子の発現調整によるMSCからセメント芽細胞への分化メカニズムの解明が可能となり、最終的には効果的な歯周組織再生につながることが期待される。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成24年度の研究により、1.MSCの分化関連遺伝子の網羅的解析にてHCEM-Tで92遺伝子中13種が特徴的な発現パターンを認めた。2.マイクロRNAの網羅的解析によって、374種のうち、HCEM-TにおいてMSCよりも高発現を示したのは16種であった。これらは平成24年度研究実施計画の半分以上を満たしており、さらに今後に対し重要な結果が得られたので、現在までの達成度はおおむね順調に進展していると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
主にMSCを用いて1.セメント芽細胞分化誘導における分化誘導に関与する遺伝子の同定、2.遺伝子導入によるセメント芽細胞分化誘導、3.セメント芽細胞分化誘導刺激における分化誘導および分化誘導因子の同定、4.セメント質添加形成実験、以上4つの実験を基本とし、研究を推進していく予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
上記実験に用いる細胞の購入ならびに細胞培養に必要な試薬・器具、分化誘導に必要な試薬および結果の評価に必要な試薬・器具などは適宜購入する予定である。さらに、本実験に関して十分な成果・結果が得られた場合には、前年度に得られた結果と併せて研究成果を発表していく予定である。
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