| 研究課題/領域番号 |
24500384
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
岸本 憲人 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50508299)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| キーワード | ニューロン新生 / 神経科学 / 再生医学 / 脳室下帯 |
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| 研究概要 |
初年度は、移動中の新生ニューロンと血管パターニングとの位置関係、新生ニューロン-血管間におけるSdf1/Cxcr4ケモカインシグナリングの関与を調べた。
1.移動経路過程における新生ニューロンと血管パターニングの解析:新生ニューロンと血管を二重蛍光標識したトランスジェニックフィッシュ成魚の脳切片上で免疫染色法により放射状グリアを標識後、新生ニューロン-グリア-血管の細胞間の位置関係について調べた。脳室壁に並んだ放射状グリア（神経幹細胞）から産生された新生ニューロンは、まず血管に伸びた放射状グリアの突起を伝って血管まで移動し、その後、新生ニューロンは前方の嗅球に向かって配向している血管を足場にして嗅球に移動していることを示唆する結果を得た。
2.新生ニューロンと血管におけるSdf1/Cxcr4ケモカインシグナリングの解析:Cxcr4受容体を欠損したゼブラフィッシュ成魚脳内では新生ニューロンが血管にホーミングできず、嗅球に到達した新生ニューロンの数が減少した。Cxcr4受容体のアンタゴニスト(AMD3100)で処理した成魚の脳内でも同様の異常を認めた。本ケモカインシグナリングは新生ニューロンが血管を足場にするために必要であることがわかった。
3.血管と血球を二重標識したトランスジェニックラインの作成:脳血流を調べるために、血球と血管を二重蛍光標識したトランスジェニックフィッシュを作成し、本トランスジェニックラインの稚魚(生後3日目)脳内の血流を確認した。現在、成魚まで飼育中であり、次年度に成魚脳内の血流を観察する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
現在、申請書に記載した研究計画通り、ほぼ順調に進展している。
ただし、新生ニューロン移動の足場になっている血管の種類(動脈／静脈)については、それぞれのマーカー抗体を用いて免疫染色法により解析中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度以降は、初年度に作成したトランスジェニックラインを用いて、新生ニューロンの移動、血管のパターニング、血流の関係を明らかにしていくことを目的とする。
(1) ゼブラフィッシュ成魚脳内の新生ニューロンの移動と血流の関係:初年度に作成したトランスジェニックラインを用いて、蛍光顕微鏡下で新生ニューロンが移動の際に足場にしている血管内の血流をイメージングすることによって、ニューロン移動方向と血流方向との相関性を調べる。さらに、新生ニューロンと血球を二重標識したトランスジェニックフィッシュを作成し、血流の速さと新生ニューロン移動との相関性についても解析を行う。
(2) 成魚傷害脳における新生ニューロンの移動と血管 (動脈/静脈) パターニングの解析:申請者らが確立したゼブラフィッシュ成魚傷害脳モデルおいて、脳傷害部位近傍で血管のリモデリングが起こっていることがわかっている。そこで、成魚傷害脳における新生ニューロンの分布と血管(動脈/静脈)パターニングを調べる。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
ゼブラフィッシュの飼育システムのメンテナンス（餌、ろ過フィルター等）:50千円
免疫染色における一次・二次抗体および各種試薬：1000千円
成魚から脳の単離、脳血流観察のための手術などに使用する実験器具：250千円
研究成果を学会などで発表するための旅費等：1300千円
研究成果を論文などで発表した場合の論文別刷り代又は通信費等：400千円
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