研究課題
遺伝子改変マウス・ウイルスベクターを用いて、皮質抑制性神経細胞が構成するネットワークを単一神経レベルで解析する。(I) 皮質抑制性神経細胞への入力特性:遺伝子改変マウスとウイルスベクターを用い、PV、SS、VIP発現細胞をゴルジ染色様に可視化した後、細胞体・樹状突起への各種抑制性入力を定量的に解析する (synaptic convergence)。(II) 皮質抑制性神経細胞の出力特性:PV発現細胞がゴルジ染色様に可視化されるマウスと、PV、SS、VIP発現細胞特異的にCreを発現するマウスを掛け合わせ、Cre存在下で赤色蛍光タンパクを発現するウイルスベクターを皮質に注入し、軸索末端まで可視化する。その後、単一神経細胞からPV発現神経細胞種団への出力を定量的に解析する(synaptic divergence)。(I-a) PV発現細胞への入力特性:成体マウス第一次運動野(M1)において、各種シナプス入力を光顕レベルで検討している。基本データの取得は終わり、補強データを集めつつ、論文のまとめ方を検討中である。(I-b,c) SOMもしくはVIP発現細胞への入力特性:SOMもしくはVIP発現細胞特異的に、組換え酵素であるCreを発現するノックインマウスにウイルスベクターを注入し、ゴルジ染色様に可視化することに成功している。VIPに対する各種シナプス入力の基本データの多くは取得済みである。SOMについては、その後に開始する予定である。(II) 皮質抑制性神経細胞の出力特性脳透明化技術の応用を含め、技術開発に力を入れた。実際の解析は未だスタートしていない。
2: おおむね順調に進展している
特に大きな問題は生じていない。
(I-a) PV発現細胞への入力特性:論文骨子をサポートするのに必要なデータを追加し、投稿準備にとりかかりたい。(I-b,c) SOMもしくはVIP発現細胞への入力特性:VIPに対する各種シナプス入力の基本データの多くは取得済みであり、論文投稿に向けて進んでいる。SOMについては、予備実験は開始している。本実験へつなげる予定である。(II) 皮質抑制性神経細胞の出力特性脳透明化技術の有効な応用を模索中である。新たな解析法を確立すべく、技術開発・応用に注力している。
緊急を要する物品類の購入予定が無かったため「57,559円」を翌年度分として請求することにした。昨年度と同様、主に消耗品(ウイルスベクター作成・免疫組織化学)と遺伝子改変マウス管理費に充てる予定である。
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すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (19件) (うち招待講演 1件) 備考 (1件)
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