| 研究課題/領域番号 |
24500467
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 生理学研究所 |
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研究代表者 |
小泉 周 生理学研究所, 細胞器官研究系, 准教授 (10296551)
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| 研究分担者 |
中澤 徹 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30361075)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | ニューロン・シナプス・神経回路 / 網膜 / 視覚情報処理 / 組織培養 / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
本研究は、成体哺乳類網膜の視覚情報処理において異なる機能を示す12種類の網膜神経節細胞（RGC）のシナプス統合過程の違いを知るため、樹状突起上の抑制性シナプスの空間的な分布の特徴を明らかにし、視覚情報処理機能との関係を調べることである。そのために、申請者の開発した成体哺乳類の網膜組織培養法を用いて、遺伝子銃によって抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）を遺伝子導入し、樹状突起上の抑制性シナプスの位置を可視化して、その分布特性を解析することを目的とした。
平成２４年度は、まず、網膜組織培養法と遺伝子銃による遺伝子導入を確立させた。成体のウサギおよびげっ歯類（主としてラット）網膜に対して遺伝子銃を用いて遺伝子導入を行った。ウサギの網膜は12種類のRGCの形態と機能が明確に記述されており、本研究の対象に最適であるが、ウサギそのものが高価で貴重である。そこで、以下、抑制性シナプス・マーカーの探索には、より安価で簡単に手に入れることができるげっ歯類（主としてラット）網膜をまず用いた。
次に、より忠実に抑制性シナプスをラベルする抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）の探索を行った。いくつかの抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）の候補について、これらの遺伝子を成体げっ歯類網膜に対して遺伝子導入し、RGCの樹状突起上において、より忠実に抑制性シナプスの分布を可視化する抑制性シナプス・マーカーを探索した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
より良い抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）の候補の絞り込みを行う段階に達している。
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| 今後の研究の推進方策 |
より忠実に抑制性シナプスをラベルする抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）候補の探索を引き続き行う。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
抑制性シナプス・マーカー（プラスミド）候補の分布の忠実さを、免疫染色によって内在性のGephyrin（抑制性シナプスの裏打ち分子）と共存しているかどうかで判定する。
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