| 研究課題/領域番号 |
24501012
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 千里金蘭大学 |
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研究代表者 |
實寳 智子 千里金蘭大学, 生活科学部, 教授 (70252658)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 国際情報交換 |
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| 研究概要 |
わが国では、食物アレルギー、花粉症、気管支喘息などの即時型のＩ型アレルギーが増えている。このＩ型アレルギーは抗原刺激を受けたマスト細胞が脱顆粒して、顆粒に含まれるヒスタミンなどの生理活性物質が体内で放出されることによって起こる。申請者のグループは植物由来のエッセンシャルオイルに焦点をあてて、マスト細胞の脱顆粒を抑制する物質の検索を行った。
マスト細胞の脱顆粒抑制効果は顆粒に含まれているβーヘキソサミニダーゼの酵素活性をマーカーとして測定して調べた。細胞はラット好塩基球性マスト細胞株RBL-2H3を用いた。脱顆粒反応はRBL-2H3細胞をカルシウムイオノフォアA23187で刺激して行った。A23187を加える前にサンプルとして用いたエッセンシャルオイルを添加して脱顆粒反応が抑制されるかどうかを検討した。その結果、カモミールやレモングラスに強い脱顆粒抑制効果が認められた。
次に、カモミールやレモングラスをRBL-2H3細胞に加えた場合の生存率を検討した。脱顆粒抑制効果を示す濃度のカモミールやレモングラスを加えても、RBL-2H3細胞の生存率は低下することはなく、脱顆粒反応の抑制は細胞が死ぬことによって起こるのではないことが確認された。
動物の皮膚をあらかじめ抗体で受動感作した後、抗原を投与して誘発される皮膚局所のアレルギー反応を受身皮膚アナフィラキシー（PCA反応）という。この反応において、抗原投与時にエバンスブルーなどの色素をマウスの尾静脈から注射しておくと、皮膚血管の透過性亢進による色素の漏出量でアレルギー反応の程度を調べることができる。カモミールはPCA反応を阻害しており、生体内でもアレルギー反応を抑制することが示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究の目的はマスト細胞の脱顆粒を抑制するような物質の検索をエッセンシャルオイルを対象として行い、抗アレルギー効果のあるものを検索することである。種々のエッセンシャルオイルを調べた結果、カモミールとレモングラスがマスト細胞の脱顆粒抑制効果を有することを見出した。また、これらのエッセンシャルオイルはマスト細胞の生存率には影響しないことがわかり、作用機序の一端を解明した。さらに、マウスを用いた動物実験においても、カモミールはPCA反応を抑制することが示された。これらのことは、エッセンシャルオイルであるカモミールの抗アレルギー効果を示唆するものであり、当初の目的をはたしていると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
エッセンシャルオイルであるカモミールやレモングラスがマスト細胞の脱顆粒抑制効果を有することが示された。その作用機序の一端として、これらのエッセンシャルオイルはマスト細胞の生存率には影響しないことがわかった。しかしながらどのような作用機序がはたらいてマスト細胞の脱顆粒が抑制されているかについてはさらなる検討が必要である。そのために、マスト細胞の表面に発現している抗体に対するレセプターの発現や、レセプターからの情報伝達に関与するたんぱく質のリン酸化の有無を調べる。
また、カモミールやレモングラス以外のエッセンシャルオイルについてもマスト細胞の脱顆粒抑制効果があるかどうか、マウスにおける抗アレルギー効果があるかどうかについても検討する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
マスト細胞の脱顆粒抑制機序について調べるためには、マスト細胞の表面に発現している抗体に対するレセプターの発現や、レセプターからの情報伝達に関与するたんぱく質のリン酸化の有無を検討する必要がある。この実験の遂行には、ウエスタンブロットや蛍光抗体を用いた細胞表面の蛍光免疫染色を用いる。これらの実験に必要な装置や試薬を購入する。また、他のエッセンシャルオイルの抗アレルギー効果を調べるためには細胞培養に必要な試薬やマウスを購入する必要があるので研究費をその購入にあてる予定である。
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