| 今後の研究の推進方策 |
得られたNoxo1, Gna14の腫瘍形成における機能解析を行うために、誘導型のshRNA発現ベクターならびに遺伝子発現ベクターを構築し、ノックダウン、過剰発現をコントロールできる細胞株を樹立する。さらにこれらの細胞をルシフェレースレポーター遺伝子で標識し、in vivo に移植した細胞における腫瘍形成におけるこれら遺伝子の機能解析を行う。移植の方法としては、常法である皮下への移植以外に、胃粘膜下への同所移植をおこなう。また、炎症整備量環境によって誘導され、腫瘍原性に果たす役割が微小転移した腫瘍細胞の増殖二ksん夜する可能性も考え、脾臓、直腸への移植による転移における役割についても調べる。
一方で腫瘍原性と未分化状態における役割が、がん幹細胞としての性質にも関与している事を考え、スフェア形成における役割の解析をさらに進め、幹細胞マーカーの発現との関与についてもFACSを用いて調べる。
Noxo1はNADPH oxidase organizerをコードし、活性酸素を生成する酵素複合体の因子として働く事が知られている。この観点から、Noxo1による活性酸素レベルの変化とその胃がんにおける役割を、胃がんモデルマウスとNADPH oxidase阻害剤を用いた実験より調べる。また、in vitroにおいて、腫瘍原性とNoxo1, 活性酸素の関連について調べる。
また、これら遺伝子のin vivoでの機能を解析するために、コンディショナルノックアウトマウスの作出のためのベクター構築も始める。
これらの実験より、Noxo1, Gna14の腫瘍形成における役割をマウスのin vivo実験を中心に明らかとし、ヒトにおける胃がんの予防、治療への適用の可能性を探っていく。
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