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膜たんぱく質であるインテグリンは、細胞外では細胞外基質と結合し、細胞内ではタリンやパキシリンを介して主にアクチン系細胞骨格と結合している。このように、インテグリンは、細胞基質間接着を司る分子であるが、接着以外にも、細胞運動や増殖など様々な生命現象にも関与していることが知られている。よって、膜上に局在するインテグリンのエンドサイトーシス機構を明らかにすることは、極めて重要である。それにもかかわらず、詳細は不明である。本研究では、インテグリンの細胞内領域がユビキチン化されることで、インテグリンがエンドサイトーシスされるという仮説を立て、各種解析を行っている。
これまでに、インテグリンα5β1をユビキチン化する酵素を、RNAi法を用いて検索したところ、HECT型ユビキチン化酵素であるNedd4Lが候補として見出されてきた。そこで、Nedd4Lをノックダウンした細胞において、細胞運動が減少するか否かを検証した。インテグリンは細胞運動に関与しており、適切な細胞運動の進展には、膜上のインテグリンが適切にエンドサイトーシスされることが必要である。wound healing アッセイ法を用い、細胞運動能を測定したところ、Nedd4Lをノックダウンした細胞では、コントロールに比べ細胞運動能が減少していた。このことから、Nedd4Lがノックダウンされた細胞では、インテグリンのエンドサイトーシス量が減少し、細胞運動能が減少したと考えられる。Nedd4Lがインテグリンのユビキチン化に関与していることが示唆された。
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