形質細胞様キラー樹状細胞の製造技術に関する研究

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24501330
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 下平 滋隆 信州大学, 学術研究院医学系(医学部附属病院), 准教授 (80345751)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 樹状細胞 / がんワクチン / インターフェロン / キラー活性 / Ｇ－ＣＳＦ / ＭＭＰ－９

研究実績の概要

NK活性を有する（樹状細胞）DCワクチンの製造工程を確立するために，非臨床試験として，単球から非接着法による培養系により従来の7日間から4日間に培養期間が短縮でき，IFN（Interferonα）およびGM-CSF（顆粒球単球コロニー刺激因子）の至適サイトカイン濃度を確定させ，免疫賦活剤（OK-432）との最適化を検証した。K562を標的とした細胞傷害活性(キラー活性)として，30%の機能を有するキラーDCの調製方法を構築し，その活性はCD56抗原と相関し，OK-432添加によりさらにキラー活性は増強した。古典的な接着法によるIL-4を用いたIL-4-DC（キラー活性5%未満）に比較して，抗原提示能および貪食能は同等，非接着法により単球からの樹状細胞改変率は有意に向上し，生細胞率も改善した。
古典的なIL-4-DCを用いた「樹状細胞及び腫瘍抗原を用いたがんワクチン療法（先進医療A, 公知番号26）」の細胞作製工程では，DC数は成分採血で回収される原料の単球数に依存しているが，G-CSF（顆粒球コロニー刺激因子）が，DC作製数に有意な影響を与えていたことが判った。そこで接着因子のDNAマイクロアレイの検討により，成分採血の16～18時間前に低用量G-CSF (Filgrastim 75μg)を投与することにより，単球数は1.5倍に増加，単球のMatrix metalloproteinase-9 （MMP-9）を増幅させ，DC作製数およびHLA関連機能分子を高める薬効があった。さらに後方視的な臨床評価により成分採血16～18時間前に低用量G-CSF（Filgrastim 75μg）が投与された群では非投与群に比較して，WT1を腫瘍抗原とする特異的能動免疫の誘導割合が有意に高かった。

研究成果

• [雑誌論文] Smoking influences the yield of dendritic cells for cancer immunotherapy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shimodaira S, Higuchi Y, Koya T, Kobayashi T, Yanagisawa R, Hirabayashi K, Ito K, Koizumi T, Maejima S, Udagawa N.
  • 雑誌名: Pharmaceut Reg Affairs 巻: 4 ページ: 1
  • DOI: 10.4172/2167-7689.1000133
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Safety and tolerability of allogeneic dendritic cell vaccination with induction of WT1-specific T cells in a pediatric donor and pediatric patient with relapsed leukemia: A case report and review of the literature. (2015)
  • 著者名/発表者名: Saito S, Yanagisawa R, Yoshikawa K, Higuchi Y, Koya T, Yoshizawa K, Tanaka M, Sakashita K, Kobayashi T, Kurata T, Hirabayashi K, Nakazawa Y, Shiohara M, Yonemitsu Y, Okamoto M, Sugiyama S, Koike K, Shimodaira S.
  • 雑誌名: Cytotherapy 巻: 17 ページ: 330-335
  • DOI: 10.1016/j.jcyt.2014.10.003
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Therapeutic effect of intratumoral injections of dendritic cells for locally recurrent gastric cancer: a case report. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Sakabe T, Chiba A, Nakajima A, Okamoto M, Shimodaira S, Yonemitsu Y, Shibamoto Y, Suzuki N, Nagaya M.
  • 雑誌名: World J Surg Oncol 巻: 12 ページ: 390
  • DOI: 10.1186/1477-7819-12-390
  • 査読あり
• [雑誌論文] The feasibility and clinical effects of dendritic cell-based immunotherapy targeting synthesized peptides for recurrent ovarian cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Chiba A, Izawa H, Yanagida E, Okamoto M, Shimodaira S, Yonemitsu Y, Shibamoto Y, Suzuki N, Nagaya M; The DC-vaccine study group at the Japan Society of Innovative Cell Therapy (J-SICT).
  • 雑誌名: J Ovarian Res 巻: 7 ページ: 48
  • DOI: 10.1186/1757-2215-7-48
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Treatment with chemotherapy and dendritic cells pulsed with multiple Wilms' tumor 1 (WT1)-specific MHC class I/II-restricted epitopes for pancreatic cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Koido S, Homma S, Okamoto M, Takakura K, Mori M, Yoshizaki S, Tsukinaga S, Odahara S, Koyama S, Imazu H, Uchiyama K, Kajihara M, Arakawa H, Misawa T, Toyama Y, Yanagisawa S, Ikegami M, Kan S, Hayashi K, Komita H, Kamata Y, Ito M, Ishidao T, Yusa S, Shimodaira S, Gong J, Sugiyama H, Ohkusa T, Tajiri H.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 巻: 20 ページ: 4228-39
  • DOI: 10.1158/1078-0432
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic factors related to add-on dendritic cell vaccines on patients with inoperable pancreatic cancer receiving chemotherapy: a multicenter analysis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Shimodaira S, Nagai K, Ogasawara M, Takahashi H, Abe H, Tanii M, Okamoto M, Tsujitani S, Yusa S, Ishidao T, Kishimoto J, Shibamoto Y, Nagaya M, Yonemitsu Y; DC Vaccine Study Group at the Japan Society of Innovative Cell Therapy (J-SICT).
  • 雑誌名: Cancer Immunol Immunother 巻: 63 ページ: 797-806
  • DOI: 10.1007/s00262-014-1554-7
  • 査読あり
• [学会発表] Dendritic cell-based Cancer Immunotherapy (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigetaka Shimodaira
  • 学会等名: 3rd International Conference on Hematology& Blood Disorders
  • 発表場所: Atlanta, USA
  • 年月日: 2015-11-02 – 2015-11-04
  • 招待講演
• [学会発表] Safety and tolerability of allogeneic dendritic cell vaccination targeting Wilms’ tumor 1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigetaka Shimodaira
  • 学会等名: 16th Royan International Research Award
  • 発表場所: Tehran, IRAN
  • 年月日: 2015-09-02 – 2015-09-04
  • 招待講演
• [学会発表] 再生医療等の安全性の確保等に関する法律に対応した樹状細胞製剤の評価に関する検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小屋照継，樋口由美子，湯沢美紀，水野由美子，山岡直子，曽根田美樹，堀内香与，平林耕一，小林孝至，下平滋隆
  • 学会等名: 第14回 日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜 （パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2015-03-21
• [学会発表] 樹状細胞及び腫瘍抗原ペプチドを用いたがんワクチン療法 (2014)
  • 著者名/発表者名: 下平滋隆
  • 学会等名: 第62回 日本輸血・細胞治療学会総会
  • 発表場所: 奈良 （奈良県新公会堂）
  • 年月日: 2014-05-17
• [学会発表] 空路搬送に伴うＸ線検査がWT1ペプチドに及ぼす影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 樋口由美子, 高橋香織, 吉澤清司, 小屋照継, 川久保雅友, 下平滋隆
  • 学会等名: 第62回 日本輸血・細胞治療学会総会
  • 発表場所: 奈良 （奈良県文化会館）
  • 年月日: 2014-05-16
• [備考] 信州大学 学術情報オンラインシステムＳＯＡＲ
  • URL: http://www.shinshu-u.ac.jp/soar/
• [産業財産権] IFNを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法 (2015)
  • 発明者名: 下平滋隆，小屋照継
  • 権利者名: 国立大学法人信州大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2015-53804
  • 出願年月日: 2015-03-17