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2013 年度 実施状況報告書

光合成の強光ストレス傷害からの再生機構

研究課題

研究課題/領域番号 24570039
研究機関埼玉大学

研究代表者

西山 佳孝  埼玉大学, 理工学研究科, 教授 (30281588)

研究分担者 高橋 康弘  埼玉大学, 理工学研究科, 教授 (10154874)
キーワード光合成 / ストレス応答 / 強光ストレス / タンパク質合成 / 翻訳因子
研究概要

光化学系II(PSII)は強光に対して感受性が高く、容易に失活する。近年、D1タンパク質などPSIIの修復に必要なタンパク質の新規合成が、強光下で発生する活性酸素によって翻訳伸長の段階で阻害されることが明らかになっている。これまでにシアノバクテリアSynechocystis sp. PCC 6803では、タンパク質合成系の翻訳因子EF-Gの酸化が修復阻害の要因の一つだと特定されている。しかし、他の翻訳因子が酸化傷害を受けているかどうか不明である。そこで本研究では、翻訳伸長に関与する他の翻訳因子EF-Tuの酸化感受性をin vitroとin vivoの双方の系で明らかにすることを目的とした。組み換えEF-Tuタンパク質を作製して酸化感受性を調べたところ、過酸化水素の存在下でCys82が分子間ジスルフィド結合を形成して失活することがわかった。さらに酸化型EF-Tuの一部が20量体以上からなる巨大な複合体を形成することや、これらの酸化型EF-Tuはチオレドキシンによって還元され再活性化されることもわかった。次に、PSIIの強光応答と翻訳因子EF-Tuの失活との関連をin vivoで調べるために、Cys82をセリンに改変した変異型EF-Tu(C82S)を共発現させた株(共発現株)と野生型EF-Tuを過剰発現させた株(過剰発現株)を作製してPSIIの光阻害を解析した。その結果、両変異株では野生株に比べてタンパク質合成に依存したPSIIの修復が促進し、光阻害が緩和された。しかし、さらに強い光条件下において、共発現株では逆に光阻害が促進した。以上の結果から、EF-Tuも活性酸素の標的であるが、その酸化傷害が強光ストレス応答で防御的な役割を担っていることが示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

H25年度の研究で、シアノバクテリア翻訳系でEF-G以外の酸化的因子EF-Tuを同定できたことは当初の計画通り研究が進行していると言える。また、EF-Tuの過剰発現や改変によってタンパク質合成の酸化ストレス耐性が増大し、光化学系IIの強光ストレス耐性が著しく増大したことは、当初の予想を超える成果であった。しかし、光化学系II自身の再構成機構に関しては研究が遅れいている。

今後の研究の推進方策

翻訳因子EF-Tuの過剰発現株や改変株において、強光ストレス条件下でEF-Tuのレドックス状態をモニターする必要がある。また、in vitroの実験系で見えたEF-Tuの巨大複合体の構造解析や、in vivoにおける観察も実施する必要がある。さらに、光合成の強光ストレス耐性における翻訳因子EF-GおよびEF-Tuのレドックス変化の生理学的役割を解明していく予定である。最後に、光化学系II複合体の再生機構を、研究代表者らが開発したin vitro修復系を使って明らかにしていく予定である。

  • 研究成果

    (24件)

すべて 2014 2013 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (20件) (うち招待講演 3件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Okuyama, H. and Nishiyama, Y. (2013) Expression of a highly active catalase VktA in the cyanobacterium Synechococcus elongatus PCC 7942 alleviates the photoinhibition of photosystem II2013

    • 著者名/発表者名
      Jimbo, H., Noda, A., Hayashi, H., Nagano, T., Yumoto, I., Orikasa, Y., Okuyama, H. and Nishiyama, Y.
    • 雑誌名

      Photosynth. Res.

      巻: 117 ページ: 509-515

    • DOI

      10.1007/s11120-013-9804-7

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterization of the plastidic phosphate translocators in the inducible crassulacean acid metabolism plant Mesembryanthemum crystallinum2013

    • 著者名/発表者名
      Kore-eda, S., Nozawa, A., Okada, Y., Takashi, K., Azad, M.A.K., Ohnishi, J., Nishiyama, Y. and Tozawa, Y.
    • 雑誌名

      Biosci. Biotech. Biochem.

      巻: 77 ページ: 1511-1516

    • DOI

      org/10.1271/bbb.130174

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Deletion of the transcriptional regulator cyAbrB2 de-regulates primary carbon metabolism in Synechocystis sp. PCC 68032013

    • 著者名/発表者名
      Kaniya, Y., Kizawa, A., Miyagi, A., Kawai-Yamada, M., Uchimiya, H., Kaneko, Y., Nishiyama, Y. and Hihara, Y.
    • 雑誌名

      Plant Physiol.

      巻: 162 ページ: 1153-1163

    • DOI

      10.1104/pp.113.218784

    • 査読あり
  • [学会発表] Action of reactive oxygen species in photoinhibition of photosystem II2014

    • 著者名/発表者名
      Nishiyama, Y.
    • 学会等名
      Department Seminar, University of California, Berkeley
    • 発表場所
      Berkeley, USA
    • 年月日
      20140325-20140325
    • 招待講演
  • [学会発表] シアノバクテリア翻訳因子EF-Tuの酸化傷害と光化学系IIの強光応答2014

    • 著者名/発表者名
      神保晴彦、Rayakorn Yutthanasirikul、永野孝典、西山佳孝
    • 学会等名
      第55回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      富山大学(富山)
    • 年月日
      20140318-20140320
  • [学会発表] Redox regulation of the translation factor EF-Tu in the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 68032014

    • 著者名/発表者名
      Rayakorn Yutthanasirikul, Takanori Nagano, Takashi Kanamori, Takuya Ueda, Takamitsu Haruyama, Hiroki Konno, Keisuke, Yoshida, Toru Hisabori, and Yoshitaka Nishiyama
    • 学会等名
      第55回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      富山大学(富山)
    • 年月日
      20140318-20140320
  • [学会発表] シアノバクテリアの光阻害防御機構における熱放散の役割2014

    • 著者名/発表者名
      草間友里、井上修平、園池公毅、高市真一、西山佳孝
    • 学会等名
      第55回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      富山大学(富山)
    • 年月日
      20140318-20140320
  • [学会発表] 葉緑体翻訳因子EF-GおよびEF-Tuの酸化ストレス応答性2014

    • 著者名/発表者名
      米山拓、大窪孝幸、永野孝典、金森崇、上田卓也、久堀徹、西山佳孝
    • 学会等名
      第55回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      富山大学(富山)
    • 年月日
      20140318-20140320
  • [学会発表] 赤潮藻類における光化学系IIの光阻害に対する温度の影響2014

    • 著者名/発表者名
      桑原悠輔、濱口卓也、紫加田知幸、西山佳孝
    • 学会等名
      第55回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      富山大学(富山)
    • 年月日
      20140318-20140320
  • [学会発表] 光合成生物におけるタンパク質合成系のレドックス制御2014

    • 著者名/発表者名
      西山佳孝、Rayakorn Yutthanasirikul、神保晴彦、永野孝典
    • 学会等名
      物質・デバイス領域共同研究拠点「生体機能物質の機能および制御の解析とバイオデバイスへの応用」第1回ワークショップ
    • 発表場所
      東京工業大学(横浜)
    • 年月日
      20140306-20140306
  • [学会発表] 大腸菌翻訳因EF-Gの酸化傷害とレドックス制御2014

    • 著者名/発表者名
      永野孝典、西山佳孝
    • 学会等名
      物質・デバイス領域共同研究拠点「生体機能物質の機能および制御の解析とバイオデバイスへの応用」第1回ワークショップ
    • 発表場所
      東京工業大学(横浜)
    • 年月日
      20140306-20140306
  • [学会発表] 大腸菌翻訳系におけるEF-Gの酸化傷害とレドックス制御の分子機構2013

    • 著者名/発表者名
      永野孝典、Rayakorn Yutthanasirikul、久堀徹、金森崇、竹内(富田)野乃、上田卓也、西山佳孝
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(神戸)
    • 年月日
      20131203-20131206
  • [学会発表] Oxidative damage to translation factor EF-Tu and its redox regulation in Synechocystis sp. PCC 68032013

    • 著者名/発表者名
      Yutthanasirikul, R., Nagano, T., Hisabori, T., Kanamori, T., Ueda, T., Nishiyama, Y.
    • 学会等名
      かずさDNA研究所研究会「ラン藻の分子生物学2013」
    • 発表場所
      かずさDNA研究所(木更津)
    • 年月日
      20131122-20131123
  • [学会発表] 翻訳因子EF-Tuの改変が光化学系IIの光阻害に及ぼす効果2013

    • 著者名/発表者名
      神保晴彦、Yutthanasirikul, R.、永野孝典、西山佳孝
    • 学会等名
      かずさDNA研究所研究会「ラン藻の分子生物学2013」
    • 発表場所
      かずさDNA研究所(木更津)
    • 年月日
      20131122-20131123
  • [学会発表] 光化学系IIの光防御機構におけるカロテノイドの作用2013

    • 著者名/発表者名
      草間友里、井上修平、園池公毅、高市真一、西山佳孝
    • 学会等名
      かずさDNA研究所研究会「ラン藻の分子生物学2013」
    • 発表場所
      かずさDNA研究所(木更津)
    • 年月日
      20131122-20131123
  • [学会発表] 光合成の強光ストレス耐性の向上2013

    • 著者名/発表者名
      西山佳孝
    • 学会等名
      第1回SUPER FORUMシンポジウム
    • 発表場所
      埼玉大学(さいたま)
    • 年月日
      20131120-20131120
    • 招待講演
  • [学会発表] 大腸菌翻訳系におけるEF-Gの酸化傷害とレドックス制御2013

    • 著者名/発表者名
      永野孝典、Rayakorn Yutthanasirikul、久堀徹、金森崇、竹内(富田)野乃、上田卓也、西山佳孝
    • 学会等名
      第8回無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      新潟大学(新潟)
    • 年月日
      20131021-20131022
  • [学会発表] 大腸菌翻訳因子EF-Gの酸化傷害とレドックス制御の分子機構2013

    • 著者名/発表者名
      永野孝典、Yutthanasirikul, R.、久堀徹、金森崇、竹内(富田)野乃、上田卓也、西山佳孝
    • 学会等名
      第86回日本生化学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜)
    • 年月日
      20130911-20130913
  • [学会発表] Molecular mechanism of oxidative damage to the translation factor EF-Tu from the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 68032013

    • 著者名/発表者名
      Yutthanasirikul, R., Nagano, T., Hisabori, T., Kanamori, T., Ueda, T., Nishiyama, Y.
    • 学会等名
      第86回日本生化学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜)
    • 年月日
      20130911-20130913
  • [学会発表] Effects of oxidative damage to the translation factor EF-Tu on photoinhibition of photosystem II in cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 68032013

    • 著者名/発表者名
      Jimbo, H., Yutthanasirikul, R., Nagano, T., Nishiyama, Y.
    • 学会等名
      6th International Congress on Photosynthesis Research
    • 発表場所
      Saint Louis, USA
    • 年月日
      20130810-20130817
  • [学会発表] シアノバクテリア光化学系IIの光防御機構におけるカロテノイドの役割2013

    • 著者名/発表者名
      草間友里、井上修平、園池公毅、高市真一、西山佳孝
    • 学会等名
      第4回日本光合成学会年会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋)
    • 年月日
      20130531-20130601
  • [学会発表] シアノバクテリア光化学系IIの強光応答における翻訳因子EF-Tu改変の影響2013

    • 著者名/発表者名
      神保晴彦、Yutthanasirikul, R.、永野孝典、西山佳孝
    • 学会等名
      第4回日本光合成学会年会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋)
    • 年月日
      20130531-20130601
  • [学会発表] Oxidative damage to protein synthesis during photoinhibition of photosystem II2013

    • 著者名/発表者名
      Nishiyama, Y.
    • 学会等名
      RSB Seminar, The Australian National University
    • 発表場所
      Canberra, Australia
    • 年月日
      20130529-20130529
    • 招待講演
  • [備考] 環境応答研究室

    • URL

      http://www.molbiol.saitama-u.ac.jp/nishiyama/kankyo/Top.html

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公開日: 2015-05-28  

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