| 研究実績の概要 |
抗体とGPCRの安定化は創薬の更なる発展に必須である．申請者はスルホベタインが両者を安定化する予備的知見を得ていたので，安定化効果を詳細に解析し適用範囲と限界を見極めることを本研究全体の目的とした．
H27年度に予定していた課題は，(1) 抗体の安定化，(2) GPCRの安定化, (3) G1/m4の共結晶， (4) メカニズム解析，の４つである．
(1) 抗体の攪拌刺激による凝集はシリコンオイルで加速されることを種々の方法で確認した．一方，スルホベタインはその凝集の防止には有効ではなかった．
(2) m2-receptorの安定化についてNDSB類の構造活性相関を解析した．その結果，安定化能と密接に関連する構造上の特徴を見いだした．それを基に新規なNDSBを合成したところ，従来のNDSBよりもはるかに強い安定化能を示した．一方，TMAOなどの古典的な安定化剤は効果が弱いことを見いだした．
(3) Gαi1の１つの変異体はm4受容体部分ペプチドと強く結合するものの，活性化されないことを見いだした．この複合体は凝集する傾向が弱いので，結晶化に適したサンプルであると考えられる．現在，結晶化条件を詰めている．
(4) NBDS-195はユビキチンを安定化するが，天然状態でのconformer変換は促進する事をNMRの緩和測定で見いだした．この機能はNDSBが有するリフォールディング促進能に密接に関連していると考えられる．
|
