研究課題
配偶子形成に必須な減数分裂では二回の分裂が続けて起こり、第一分裂では相同染色体が分配される。この分配には減数分裂特異的な動原体構造形成が必要であるが、この構造形成制御機構は多くが未解明である。我々は分裂酵母を用い、減数分裂特異的な動原体構造制御機構の解明を試みた。減数第一分裂には相同染色体が組み換えによって生じたキアズマによって結合することも必要である。このキアズマ形成にはテロメアが集合することが必要だが、我々は昨年度までに、このテロメア集合はテロメアに形成される中心体類似構造体「テロセントロゾーム」によって起こることを見いだしている。今回新たに、このテロメア集合に異常が生じると、減数分裂期におこる動原体の再構築が阻害されることを見いだした。動原体の再構築が阻害されると姉妹染色分体の均等分配が増加することから、この再構築が起こらないと減数分裂特異的な動原体構造形成に異常が生じると考えられた。さらに、この動原体制御にテロメア結合因子であるTaz1が関与することを見いだした。このことは、テロメア集合はキアズマ形成だけでなく、動原体構造制御に重要な働きを果たすことを示している。減数分裂開始に必須なPat1キナーゼに変異を導入し、ATP類似体によって阻害されるpat1変異株を作成した。これによって、DNA複製関連因子の温度感受性変異を導入することにより、DNA複製期およびDNA複製終了後にDNA複製関連因子の機能を阻害する細胞系の確立に成功した。これを用いることによって動原体構造制御におけるDNA複製関連因子のDNA複製期の機能を解析することが可能となった。
2: おおむね順調に進展している
動原体構造制御とテロメア集合の新たな関連性が明らかとなり、研究に大きな進展が見られた。また、pat1変異体の作成に成功し、今後のDNA複製関連因子と動原体構造制御との関わりを解析することが可能となった。ただ、テロメア集合と動原体構造制御に労力がとられてしまったため、セントロメアの動態制御解析が当初の予定ほどあまり進んでおらず、さらに動原体の方向性を解析するためのアッセイ系の構築が遅れているため、おおむね順調に進んではいるものの、計画以上に進展しているとはいえない。
今年度は動原体構造制御におけるテロメア集合の関与を学術論文として発表することに重点をおく。また、動原体制御におけるDNA複製因子の働きとDNA複製期との関連性をpat1変異体を用いて明らかにする。また、セントロメアの動態制御のデータを取得し、動原体構造と染色体分配との関連性を明らかにすることをめざす。さらに動原体の方向性を解析するためのアッセイ系の完成をめざす。
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Cellular and Molecular Life Science
巻: 71 ページ: 2119-2134
10.1007/s00018-013-1548-1
http://www.ipc.shizuoka.ac.jp/~sayamam/yamamoto_Japanese.files/yamamotolab_homepage_publication.html