|
トマト共生関連遺伝子を同定し、これら遺伝子の機能欠損がネコブセンチュウ感染に与える影響を調べるため、RNAi 系統の作出および変異系統の TILLING スクリーニングを実施した。
マイクロトム SlSYMRK RNAi 系統を用いて、ネコブセンチュウ感染試験を実施した。まず、これらの系統が共生経路に影響を受けていることを検証するため、菌根菌感染を行った。菌根菌感染6週間後の感染領域は、野生型やベクターコントロールと比較して有意に減少した。次に、これらの系統を用いてネコブセンチュウ感染を行い、8週間後の卵塊形成数をカウントした。その結果、RNAi 系統における卵塊形成数の有意な減少は見られなかった。
マイクロトム EMS 変異誘発系統に由来する TILLING プラットフォームを用いて、共生遺伝子変異系統のスクリーニングを実施した。ここでは、SlCCaMK を標的として、異なるアミノ酸置換を伴う3アリルを単離した。菌根菌感染実験を実施した結果、一つのアリルで感染の著しい減少が認められ、その度合いは SlSYMRK RNAi 系統と比較して顕著であった。そこで、単離した SlCCaMK 変異系統を用いてネコブセンチュウ感染試験を行ったところ、感染8週間後の卵塊形成数は野生型と比較して有意に減少していた。以上の結果から、共生経路の機能欠損の度合いが高いほど、ネコブセンチュウ感染への影響が強いことが示唆された。
|
