| 研究概要 |
本申請の最終目標は、生きて腸内に到達し、腸内の過酸化脂質と過酸化水素を迅速に分解する乳酸菌株の機能開発である。
プロバイオティックス分野で、多種の乳酸菌開発が報告されているが、菌体外の過酸化物を分解する菌株開発の報告は、一般微生物界においても見いだせなかった。従って本申請では、目的株の分離からスタートし、既に過酸化脂質分解菌（L. plan. P2株）と過酸化水素分解菌(P. pent. Be1株)を分離後、本年度は分解関与の各過酸化物還元酵素系を精製を試み、両株の全関与酵素完全精製に成功した。
P. pent. Be1株は、Mg-catalase, NADH peroxidase, NADH alkylperoxide reductase(仮称）, NADH oxidaseを有し、L. plan. P2株は、NADH peroxidase, ２種のNADH alkylperoxide reductase(仮称）, NADH oxidaseを有していた。各精製酵素の反応解析（反応生成物、Km, Vmax）の結果、過酸化水素分解力の強いP. pent. Be1株は、２個の強力な過酸化水素分解酵素を持ち、過酸化脂質分解力の強い菌 L. plan. P2株は、２個の強力な過酸化脂質分解酵素NADH alkylperoxide reductase(仮称） を持っていた。
本年度は、3個の過酸脂質分解酵素遺伝子のクローニングと発現系の構築し、大量培養からの精製に成功した。単一タンパクで、NADHを電子供与体として過酸化脂質を還元する酵素の報告はなく、NADH alkylperoxide reductase(仮称）は新規酵素の可能性が大である。次年度は過酸化物分解反応安全性確認のための、それを用いた反応解析、バイオアッセイ系の確立が必要となる。
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